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windli木虫 (职业作家)
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WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程
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WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程 1、2487检测器开、关机及使用： 打开电源 仪器自检1-2min 预热5min 稳定约30min 设定通道、波长模式、波长（也可在工作站上设置） 回零（Auto Zero） 分析检测 实验完毕关掉电源开关即退出。 2、2695分离单元使用操作： 1) 开机自检 打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。 2) 脱气（Degas） 按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标 至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。 3) 设定柱温（可选项） 在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。（可在工作站方法中设置） 4) Prime Seal Wash（清洗柱塞杆） 按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。 5) Wet Prime 在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。 将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。 6) Purge Injector（注射器排气泡及清洗） 进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。 7) Prime Needle Wash（清洗注射针） 进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。 注：以上4）-7）为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。若发现注射器中有气泡，则可重复6）直至排除。如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4））。 8) 平衡柱子 在“Status（1）”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，再Wet Prime操作一次，然后设置流速，平衡色谱柱30-60min。 9) 放置样品 拉开样品转盘舱门，将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中，记下样品瓶号，关上舱门。 10) 检测样品 打开工作站，设置仪器方法、方法组、自动进样序列等，监视基线、检测样品。 11) 分析处理数据、打印报告 12) 清洗注射器、针、柱塞杆 参见上述4)、7)。 13) 清洗色谱柱 用水冲洗柱子40-60min（视柱子规格不同，流速通常1ml/min）；然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min（流速1ml/min）。 14) 关机 关掉电源开关。 另外有相关注意资料 1、 检测器波长范围：190-700nm 2、 可以进行紫外扫描（scan），参考媒体播放 3、 清洗柱塞杆的溶剂可以用水，或5%-10%甲醇（抑菌） 4、 清洗针的溶剂可以根据样品溶解性选择，如甲醇，或异丙醇-水（1：1） 5、 清洗柱塞杆操作“prime seal wash”“start”后，看有溶液流出，持续一段时间后，按下“HALT”，“CLOSE” 冲洗1-2min即可，1次。可以每天开机后进行，或结束实验时进行。流动相中有盐，结束实验时一定要清洗。仪器不自动进行。 6、 每次仪器打开后，会自动进行的操作有：①START UP DIAGNOSTICS; ②WATERS ALLIANCE SEPERATIONS MODULE, REV2.03, INITIALIZING;③INITIALIZING NEEDLE ＆ SYRINGE; ④INITIALIZING CAROUSELS; ⑤INITIALIZING SOLVENT SYSTEM; ⑥IDLE （在屏幕上有显示） 7、 “实验结束后要purge injector”，1次即可，包括了“purge sample loop”。 8、 在线脱气机打开后，开始时运行加速，使压力很快降到1.0psi以下，然后维持在0.5psi左右。 9、 怀疑管路堵塞可卸下单向阀、在线过滤器进行清洗。单向阀安装注意方向。 10、 本仪器配置注射器体积250ul，样品环100ul。可在“CONFIG”中查看。 11、 样品环体积可换；但同时注射器体积也应匹配。注射器体积有25、100、250、2500等。 12、 在检测器中“DIAG”中可以查看“SAMPLE ENERGY”、“REFERENCE ENERGY”等参数，了解紫外灯的使用情况。 13、 检测器要经常用“SHIFT +3”来校正波长，保证其准确性。每1-2周检查1次。先清洗检测池。清洗检测池可以在线进行，不用卸下；具体操作是，用双向接头替代色谱柱，流速设置为1ml/min，用0.45m滤膜过滤过的甲醇冲洗15min-30min即可达到清洗目的。 14、 2台仪器可以共用一个工作站（工作站升级为多系统）；但2台仪器不能同时用一个项目采集样品。 15、 基线平衡后纵坐标可达到小数点后第4位（很平稳）。 16、 可单针自动进样，也可以成组进样；成组进样需要编辑样品组方法（包括瓶号、样品名、进样体积、进样次数、功能、方法组/报告方法、下一针延迟等）。样品组方法可保存、调用。（ctrl +D可以用于列复制是“下同”之意。） 17、 样品组方法里的“功能”一项，有“平衡”及“平衡色谱柱”两个选项，其功能不同；若仪器方法选用梯度，用“平衡色谱柱”可以在进样前运行梯度来平衡柱子；而如果选用“平衡”则只是按照初始梯度条件等度平衡柱子。（当然，如果是用等度的流动相条件，则两者没有区别） 18、 编辑仪器方法时注意： 1) 2695“通用”标签下，“单次输送体积”数值根据流动相流速不同有别：流速＜0.3时，选25；流速在0.3-1.0时，选50；流速＞1.0时，选100。“针头深度”除样品瓶选用内插管时设为2，其余均用默认值0。 2) “脱气”标签下，“脱气模式”选择“开”即可。 3) “流量”中编辑流动相比例及梯度条件；“温度”标签下，可以启用柱温设置“目标柱温”等。 4) “溶剂”为可选备注项。其余“事件”、“通道”不用设置。 5) 2487在“通用”标签下选择“波长模式”，启用通道；在相应“通道1”或“通道2”下设置波长即可，其余不动。 6) AUFS值在此仪器中没有启用，不改变面积大小。 19、 注射器中的气泡快速有效排除方法：可以小心的卸下注射器抽吸甲醇排除气泡后，注射器中保留少量溶剂，做“purge injector”小心安装上，再做几次“purge injector”观察没有气泡即可。 其他方法，如WATERS 工程师讲可以在“purge injector”开始后、注射器杆向上时，拧掉下边螺丝，上下抽推排除气泡。溶剂用甲醇较好；不用同时拧掉上方注射器。 20、 检测器开机自检结束时有时会提示“calibration differs.521nm”,这是仪器自检后提示与上一次自检结果有出入，原因很多，可能是检测池中有小气泡，检测池污染，也可能是流路中溶剂有变动。分析原因，清洗检测池，排气泡，或者请工程师帮助。 21、 要注意样品瓶中死体积大小，防止供试液体积不足，针头吸不到。 供大家参考，希望对大家工作有所帮助 |
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