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【求助/交流】柱材料怎么处理？ 已有7人参与
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| 我在做蛋白纯化，现在用G-150，胶是新的，我溶胀后，洗了很多次可是感觉胶还是不干净，而且水面上一直飘了一层不知道是什么，倒掉再洗还是有，亲们，新胶要怎么处理啊？ |
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cnlics
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):热心回答 2010-07-31 13:21:37
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看天(金币+5):热心回答 2010-07-31 13:21:37
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你的胶要煮一煮，然后静置，等胶差不多全部沉淀后，把上面还悬浮着的小颗粒倒掉；还可以把胶搅起来，稍微静置，然后把上层胶转移到另外一个容器中。这样做的目的是提高胶颗粒的均一性，装柱的时候就更均匀了。煮过的胶，静置冷却后，可以直接装柱，不用抽气，因为煮的过程已经去气了。装柱关键在于操作方面，先把柱子里面加上5cm左右的缓冲液，把胶轻缓地搅匀，然后用玻棒引流，把胶溶液均匀又较快地流入柱中，等胶沉淀完毕，流掉一部分缓冲液，还留10cm左右，把上层胶再轻缓地搅匀，继续加胶。如此如此。。。。装柱要轻柔，要诀是不能产生气泡。 柱色谱，要的是细心，耐性和体力。无论男女做，都是苦差事。 如果感觉胶不干净了，就用1N的NaOH浸泡过夜。所谓1N就是称40g的NaOH溶于1L的水中。 Sephadex是葡聚糖，最好别用酸泡，那样会发生水解。好像工业上生产葡萄糖，就是用寡糖酸解的。 [ Last edited by cnlics on 2010-7-31 at 11:11 ] |
11楼2010-07-31 10:59:25
2楼2010-07-30 10:18:40
刘小乐
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