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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我想我是疯掉了，如此疯狂的PCR
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
★
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1949stone:有时看运气 2010-07-28 17:12:03
做分子实验就是出结果很难的，偶也只能祝你好运了~~加油哈
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哎哟~可爱QQ~不错哦~~
11楼2010-07-28 16:21:46
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wjw992008

银虫 (小有名气)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-07-29 14:10:44
经验告诉我们，如果引物是特异的，弱弱的PCR扩增条带十有八九是假阳性。
能否告知做的是什么实验？因为我之前也有这种情况，假阳性转化克隆子扩增出相应的弱带而且有杂带，后来得到的阳性克隆子都是相当特异的一条亮带。
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12楼2010-07-28 17:25:49
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-07-29 14:11:30
你现在着急也是没用的。这个试剂也换，那个试剂也换，还是抱有幻想。其实没那么复杂。照我看，如果你做的是禾本科植物的话，应该是假阳性，只能是多得到些转基因植株，碰到真正的阳性植株的几率大些。那时候，无论怎么做PCR也会出带的。沉住气。
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13楼2010-07-28 17:44:43
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seahow

木虫 (著名写手)
要耐心，楼主有些毛躁，如果这样是不适合做科研的了；
不要灰心。
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14楼2010-07-28 17:48:48
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★
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只能再摸索摸索条件了，大家差不多的
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自己的路，自己快乐的走
15楼2010-07-28 19:28:37
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可可猫

铜虫 (小有名气)
★ ★
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scelab(金币+1):会好起来的 2010-09-02 22:54:11
我前几天也是P不出来，这两天终于又好了

建议把所有东西都换过，我就是这样的

模板重新稀释，引物重新稀释，酶换了新的，MgCl以及Buffer都用新的，水也是新灭的
就OK了

我也在狂做PCR，共勉吧
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16楼2010-07-28 22:03:00
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
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lstt09nk(金币+1):这个建议不错，哈哈 2010-07-29 14:12:14
又是pcr的问题，看来版主大人得专门开个pcr转帖了，请来大人们给大家开个讲座~
其实楼主不用郁闷，变换一下体系，引物和酶的用量，还有就是程序的改变，梯度的选择都很重要，网上很多的~
加油！！！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
17楼2010-07-28 22:58:37
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★
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我有过类似经历。更换了新的buffer和DNTP解决了，后来发现是DNTP太久的缘故.good luck
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仕不可不弘毅，任重而道远
18楼2010-07-29 00:16:01
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风荻

金虫 (小有名气)
★
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同意十一楼的，如果是很弱弱的一条带，LZ可能遇到了假阳性了

加油！！
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19楼2010-07-29 08:24:22
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
感动的想哭……谢谢楼上各位的好心人，我会坚持的，大家一起加油，谢谢……顺祝大家好运！
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20楼2010-07-29 08:25:35
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