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寂寞之巅

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-07-20 12:15:50:
可以加PMSF吧

PMSF作用时间只有半个小时
好好学习,天天向上
11楼2010-07-21 09:29:58
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

超滤

引用回帖:
Originally posted by 寂寞之巅 at 2010-07-20 10:24:41:

你可以看一下文献 文献中浓缩时加了几种  
有没有考虑超滤浓缩   
你的蛋白有很多条带 是大于还是小于  你还写考虑浓缩时蛋白浓度多高蛋白聚集的情况

超滤 暂时还没有做过
条带都是小于目的蛋白的
12楼2010-07-21 11:03:28
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by lwiaanngg at 2010-07-20 10:34:55:
1 在SDS-PAGE图中,高盐度的样品中微量蛋白不容易看见
2 无论你怎么纯化,都不可能是100%的纯的,IMAC能到95%一般就是不错的。
3 确认你的试剂,例如PBS中有无蛋白污染。

PBA中肯定是没有杂蛋白的
13楼2010-07-21 11:05:32
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 辉辉集团 at 2010-07-21 11:05:32:

PBA中肯定是没有杂蛋白的

你跑胶后用银染试试,因为你并不知道配PBS的试剂中有没有痕量蛋白的存在啊
如果你试过了PBS,你算一下你的蛋白的purity,〉90%一般就可以接受的。
是否能跑出好的SDS-PAGE不光取决于你的蛋白的纯度,还有跑胶的技术。大多数所谓纯的蛋白,通过技术可以使他的杂蛋白出现或不出现

[ Last edited by lwiaanngg on 2010-7-21 at 22:33 ]
14楼2010-07-21 21:32:57
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

我要的是纯度啊 呵呵

引用回帖:
Originally posted by lwiaanngg at 2010-07-21 21:32:57:


你跑胶后用银染试试,因为你并不知道配PBS的试剂中有没有痕量蛋白的存在啊
如果你试过了PBS,你算一下你的蛋白的purity,〉90%一般就可以接受的。
是否能跑出好的SDS-PAGE不光取决于你的蛋白的纯度,还有跑 ...

啊 胶好不好看不重要 我要的是纯度啊 呵呵
15楼2010-07-22 11:39:35
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