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cancanyeah

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】如何从废水驯化的污泥微生物样品里提取蛋白 已有1人参与

本人用焦化废水连续运转了1个月的试验,驯化了一批污泥,但是由于焦化废水颜色很深,污泥吸附了很多的颜色,后来取污泥样品的时候离心洗涤了20多次颜色依旧很深(离心后上清颜色很深,弃上清,加PBS再离心,颜色依旧很深,几乎和没洗一个样),但是试验需要提取微生物里的粗蛋白做紫外扫描,如果有色度的话对吸光值影响很大,现在很困惑不知道用什么方法能将蛋白提取出来并且不带任何颜色(蛋白质不能失活变性)?

已经试了很多方法:比如加活性炭、超声分散(将吸附的颜色分散掉)后再离心洗涤。。。。都没有一点效果
不知道用密度梯度离心会不会将染料弄到另一层从而和蛋白质区分开?或者用什么硫酸铵沉淀蛋白?

现在毫无进展~~大家来帮帮忙吧
谢谢大家
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vs570588

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by cancanyeah at 2010-07-19 13:02:47:
本人用焦化废水连续运转了1个月的试验,驯化了一批污泥,但是由于焦化废水颜色很深,污泥吸附了很多的颜色,后来取污泥样品的时候离心洗涤了20多次颜色依旧很深(离心后上清颜色很深,弃上清,加PBS再离心,颜色依 ...

我也要提污泥中的蛋白质,但每次只能取很少量的样品,还要做定量,敢问怎样提取污泥的粗蛋白呀
2楼2010-07-19 21:01:07
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