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zyx3302327

新虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】梯度洗脱已有11人参与

做中药指纹图谱的梯度洗脱时在前15min的峰较多，但是峰非常的接近，有些形成肩峰，我用的是甲醇和水的洗脱前10分钟甲醇的比例少于15%，我换了好几个梯度多分不开，小比例的甲醇等度也分不开，那位大侠可以指点，谢了

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1楼 2010-07-08 12:29:51

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scy139

木虫 (小有名气)

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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢指点！ 2010-07-16 00:25:40

那就不只是梯度的问题，可能是淋洗液的极性、酸碱度、缓冲体系等方面的问题了。增加液相色谱分析时的分离度是需要多方面的因素调节的。
楼主最好根据所分析的样品中组分的保留特性，对整个分离条件作一下优化，包括溶剂、缓冲体系、酸碱度、溶剂的极性、亲水性、淋洗液的流量、温度等作一下探索。另外对于一些不易分离的组分，是否可以考虑采用不同的检测器串联在分析系统中进行检测，或通过相关的衍生法来提高检测性能。

只能给您一个概括性的指导，具体的条件需要自己去认真地做实验，并且对实验数据结果进行详细的评价和归纳。色谱的分离条件不是只凭网上讨论就能找到的，那需要做许多条件实验才可能找到。建议您参考一下高效液相色谱的一些基础知识与资料。