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entomology557

铁杆木虫 (知名作家)

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[交流] 【求助/交流】纯化的sod1活性测定已有3人参与

已经克隆、表达并纯化了一种虫子的sod1基因（铜芯sod），目前表达纯化的蛋白是可溶蛋白，想测定其活性，四处找了一下，现用南京建成的试剂盒进行检测。

但现在的检测结果是，表达出来的蛋白活性很低，我怀疑原因是不是这个sod需要更多的铜芯离子，因为我在诱导培养的时候没有额外加入铜芯离子（此蛋白需要铜芯离子的结合才能有活性）。但我查阅了很多外文文献，也没见大家都在实验方法中提出要相应的加入铜芯离子，并且文献中最后的酶活测定方法也都很含糊。

不知道有没有大侠熟悉这个蛋白，纯化后用什么方法（最好是简单、方便的试剂盒）测此蛋白的活性最好。另外lb培养基中本身含有的铜芯离子是否能满足此蛋白的需求，如果不够的话需要加多少额外的金属离子呢？不胜感激！

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生物进化基本常识：一定范围内，选择压力越大，要么进化的越快来适应这种压力，或者直接被淘汰。

1楼 2010-07-05 23:56:01

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scelab

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entomology557(金币+1):谢谢参与 2010-07-06 08:06:29

引用回帖:

Originally posted by entomology557 at 2010-07-05 23:56:01:
已经克隆、表达并纯化了一种虫子的sod1基因（铜芯sod），目前表达纯化的蛋白是可溶蛋白，想测定其活性，四处找了一下，现用南京建成的试剂盒进行检测。

但现在的检测结果是，表达出来的蛋白活性很低，我怀疑原 ...

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