应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】影响酶切的因素？
263/3返回列表上一页123
查看: 2751  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢！

引用回帖:
Originally posted by zhaohq1209 at 2010-07-01 15:58:16:
提质粒后跑电泳如果在<100bp的位置出现很亮的一团，应该就是RNA了，可以加入少量RNase室温放置几分钟进行降解。

我在37度放了不到一个小时，结果表明RNA除去了不少。
赞一下 回复此楼
21楼2010-07-07 16:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢！

引用回帖:
Originally posted by zplipeng at 2010-07-01 12:48:54:
可以在溶解DNA的溶液里加RNAse，影响酶切的因素有质粒纯度，质粒与酶的摩尔比，酶切温度，酶切时间，如果是双酶切还有共用buffer的选用，TAKRA的有些酶要加BSA和Trition

我查了通用缓冲液，就是在你说的那个公司找的！
赞一下 回复此楼
22楼2010-07-07 16:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢！

引用回帖:
Originally posted by glidingwater at 2010-07-02 07:47:37:
影响酶切的因素尚有蛋白，提取的质粒中若含有杂蛋白，可影响酶切效果（切不动或识别有误）。

知道了，我就是担心RNA 会影响。蛋白可能也会影响呀，真是学习，学习了啊！
赞一下 回复此楼
23楼2010-07-07 16:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢！

引用回帖:
Originally posted by ymzfeng at 2010-07-02 10:33:45:
RNA是没影响的
优化下你的酶切体系吧
双酶切的话要找到合适的buffer

恩，知道了，我在通用缓冲液里找的！
赞一下 回复此楼
24楼2010-07-07 16:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢！

引用回帖:
Originally posted by 最爱花诗雨 at 2010-07-02 10:37:11:
测下，质粒浓度，应该可以看出有没有RNA污染的吧，不行重提质粒，注意操作

谢谢提醒！
回复此楼
25楼2010-07-07 16:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by violet.zhou at 2010-07-07 11:33:20:
要是觉得有影响的话，做个胶回收不就没有问题了啊

恩，我用RNS酶处理了一下，回收后确实没有很大的影响！
赞一下 回复此楼
26楼2010-07-07 17:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 黎亚丽 的主题更新
263/3返回列表上一页123
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭