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黎亚丽

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Originally posted by zhaohq1209 at 2010-07-01 15:58:16:
提质粒后跑电泳如果在<100bp的位置出现很亮的一团,应该就是RNA了,可以加入少量RNase室温放置几分钟进行降解。

我在37度放了不到一个小时,结果表明RNA除去了不少。
21楼2010-07-07 16:36:36
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黎亚丽

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Originally posted by zplipeng at 2010-07-01 12:48:54:
可以在溶解DNA的溶液里加RNAse,影响酶切的因素有质粒纯度,质粒与酶的摩尔比,酶切温度,酶切时间,如果是双酶切还有共用buffer的选用,TAKRA的有些酶要加BSA和Trition

我查了通用缓冲液,就是在你说的那个公司找的!
22楼2010-07-07 16:38:13
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黎亚丽

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Originally posted by glidingwater at 2010-07-02 07:47:37:
影响酶切的因素尚有蛋白,提取的质粒中若含有杂蛋白,可影响酶切效果(切不动或识别有误)。

知道了,我就是担心RNA 会影响。蛋白可能也会影响呀,真是学习,学习了啊!
23楼2010-07-07 16:42:09
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黎亚丽

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Originally posted by ymzfeng at 2010-07-02 10:33:45:
RNA是没影响的
优化下你的酶切体系吧
双酶切的话要找到合适的buffer

恩,知道了,我在通用缓冲液里找的!
24楼2010-07-07 16:56:49
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Originally posted by 最爱花诗雨 at 2010-07-02 10:37:11:
测下,质粒浓度,应该可以看出有没有RNA污染的吧,不行重提质粒,注意操作

谢谢提醒!
25楼2010-07-07 16:57:38
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黎亚丽

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Originally posted by violet.zhou at 2010-07-07 11:33:20:
要是觉得有影响的话,做个胶回收不就没有问题了啊

恩,我用RNS酶处理了一下,回收后确实没有很大的影响!
26楼2010-07-07 17:00:39
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