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xuegyx

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】heparin column 已有4人参与

请问有哪位高人知道heparin column是干什么用的?其纯化蛋白质的原理是什么?
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

楼上正解,不过再详细些就好了~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-06-26 19:54:51
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是纯化用的柱子,原理就是亲和层析,利用目的蛋白与介质的专一性结合,从而达到分离纯化的效果!
I am not a hero , but I served with heroes!
2楼2010-06-26 19:43:28
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xuegyx

木虫 (正式写手)

一楼的回复基本没用,不够详细。比如离子交换柱,利用了蛋白质的等电点不同进行分离。heparin的亲和力又是怎么来的呢?
4楼2010-06-27 18:04:21
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jzhe961

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
heparin 是一种葡糖胺聚糖,由重复的2糖单位,最常见的2糖单位是 2-O-sulfated iduronic acid and 6-O-sulfated, N-sulfated glucosamine, IdoA(2S)-GlcNS(6S). 因为被磺酸化带大量负电荷。常用来做抗凝血剂。肝素本身不能破碎已经形成的血栓,但是可以和抗凝血酶III antithrombin III (AT) 的抑制剂结合,从而激活该酶阻止血栓的形成已经参与凝血的蛋白酶的活性。

肝素作为蛋白纯化时的亲和配体时主要通过3种方式发挥作用:
1。通过肝素筛选出特异的凝血因子或其它的肝素结合蛋白。
2。利用肝素高阳离子交换量,这是因为肝素中大量的磺酸基团赋予其负电荷。
3。利用肝素进行RNA和DNA结合蛋白的纯化,如分离转录因子和病毒膜蛋白。这是因为肝素和核酸具有类似的性质,都是带有负电荷的糖类。
具体参见wikipedia
http://en.wikipedia.org/wiki/Heparin
5楼2010-06-27 18:45:54
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