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gutidog

金虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】缓冲盐过酸把柱子弄坏了 已有7人参与

由于不小心把流动相缓冲溶液pH调错,导致过酸,使新柱子柱效严重降低,有没有什么办法恢复的啊?
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gutidog

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zpm1987 at 2010-06-22 20:24:42:
1.  取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。
2.  用HPLC  级水冲洗掉盐/缓冲液。 以1毫升/分钟的速度把  25  毫升水泵入色谱柱。
3.  用  25  毫升异丙醇冲洗色谱柱。
4.  用 ...

这个是一般柱子再生的方法,对于污染的色谱柱可以采用这方法,但是对于我这个可能没用,我之前就试过的,没用。 看来我的柱子是没得救了。
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8楼2010-06-23 15:09:10
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)


pplover(金币+1):感谢参与! 2010-06-22 21:13:30
很短的时间把柱搞坏不容易。建议用标准物质测定一下柱效
2楼2010-06-22 16:17:15
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gutidog

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhongweixu at 2010-06-22 16:17:15:
很短的时间把柱搞坏不容易。建议用标准物质测定一下柱效

坏之前柱效有10000多,坏之后只有三四千了,且峰形很差,都是用标准物质测得。
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3楼2010-06-22 16:44:45
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zpm1987

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
pplover(金币+3):感谢参与!好详细哦! 2010-06-22 21:16:55
1.  取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。
2.  用HPLC  级水冲洗掉盐/缓冲液。 以1毫升/分钟的速度把  25  毫升水泵入色谱柱。
3.  用  25  毫升异丙醇冲洗色谱柱。
4.  用  25  毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。
5.  用  25  毫升正己烷冲洗色谱柱。
6.  再次用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。
7.  用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。
8.  按正确的流动方向,把色谱柱重新连接到色谱上。 用不含缓冲液的流动相冲洗色谱柱,然后重新倒入缓冲液。
9.  用  25  到  50  毫升流动相平衡色谱柱。
10.  注入标准物或样品,检查性能是否恢复。
注释: 对于某些污染色谱柱的残留化合物,二甲基甲酰胺  
觉得你的柱子应该很难恢复了,你就把它死吗当活马医了,假如你的流动相太酸会把里面的填料破坏了,是不可逆破坏,你就试试以上方法吧
没有跨不过的坎
4楼2010-06-22 20:24:42
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