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[交流]
求助作表达时选菌株的问题
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| 我用质粒pbv220作为载体，对我的目的基因表达，表达的蛋白大约为45KD，我想知道用什么菌株（大肠杆菌）最好，就是说表达量高一些 |
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3楼2006-03-23 16:48:28
xiangyong02
荣誉版主 (职业作家)
木虫伴我行 我为木虫歌
- 应助: 0 (幼儿园)
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feizaopao(金币+1):3x啊
steincat(金币+2):多谢参与！
feizaopao(金币+1):3x啊
steincat(金币+2):多谢参与！
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给你介绍两种大肠杆菌菌株E.coli TOP10F和E.coli BL21(DE3)plysS： 两者基因型分别为： E.coli TOP10F Fˊ{lacIq Tn10(TetR)} mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 deoR recA1 araD139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR)endA1 nupG E.coli BL21(DE3)plysS F- ompT hsdSB (rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS(CamR) 两种大肠杆菌菌株使用情况 这一点非常重要，务必分清。 *九种载体的扩增须采用E.coli TOP10F，而不能采用E.coli BL21(DE3)plysS。 *九种载体的目的基因克隆须采用E.coli TOP10F，而不能采用E.coli BL21(DE3)plysS。 *克隆了目的基因的表达载体，其中1至4号载体即pLLP—OmpA、pLLP—STII、pMBP—P和pMBP—C应转化进E.coli TOP10F进行诱导表达。5至9号载体即pET—GST、pET—Trx、pET—His、pET—CKS和pET—DsbA应转化进E.coli BL21(DE3)plysS进行表达 |
2楼2006-03-23 15:59:18
5楼2006-03-31 10:51:41