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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

可是看碧云天的500次200多块钱,还是自己配试剂便宜啊。关键每次还要做标准线,比较费。我的就是纯化玩的蛋白,而且经过脱盐了,应该就是正常PBS的盐浓度,不算高吧?
引用回帖:
Originally posted by chenjpro at 2010-06-09 13:01:14:
个人觉得BCA法用于纯度高的蛋白测定比较准确。如果是杂质多,结果可能有偏差。。。(如发酵液测定)

11楼2010-06-09 14:18:24
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lansha8331

无虫 (小有名气)


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蛋白浓度测定的,有好几种方法吧,常规Lowry法,bradford法,BCA法,其中以BCA法灵敏度最高,威格拉斯公司有卖,灵敏度5-2500ug/mL
12楼2010-06-09 16:33:43
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zengfuxing

银虫 (小有名气)


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amisking:能够出实验结果那就是王道。 2010-06-09 19:36:05
听我们实验室的牛人师兄说国际上比较承认的方法现在只有BCA法。其它的方法都没这个稳定。不过不能用于测含还原剂的蛋白。生工现在出了一种BCA试剂,可用于测含低浓度还原剂的蛋白浓度。不过用起来很麻烦。
13楼2010-06-09 19:23:23
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zengfuxing

银虫 (小有名气)

不用每次做标准曲线的,做一次拟合出计算公式就好了。
引用回帖:
Originally posted by nicknelson at 2010-06-09 14:18:24:
可是看碧云天的500次200多块钱,还是自己配试剂便宜啊。关键每次还要做标准线,比较费。我的就是纯化玩的蛋白,而且经过脱盐了,应该就是正常PBS的盐浓度,不算高吧?



14楼2010-06-09 19:25:16
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

BCA法不用每次都做标准曲线吗?
引用回帖:
Originally posted by zengfuxing at 2010-06-09 19:23:23:
听我们实验室的牛人师兄说国际上比较承认的方法现在只有BCA法。其它的方法都没这个稳定。不过不能用于测含还原剂的蛋白。生工现在出了一种BCA试剂,可用于测含低浓度还原剂的蛋白浓度。不过用起来很麻烦。

15楼2010-06-11 00:10:36
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小咩咪

新虫 (初入文坛)


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8楼: Originally posted by 李鹏举 at 2010-06-09 10:23:06:
BCA法测蛋白质还是比较准确的,所用试剂可以自己配置 BCA工作液在sigma有卖,我们用的就是那的。用之前需要配置WR工作液,50:1的比例加入BCA工作液和硫酸铜。但是注意有些缓冲溶液对BCA的颜色反应有干扰。

我想问个问题,WR工作液是50:1配制。说明书上写适量配制,我一次把50ml工作液都配了,配好的WR工作液能保存多久。会对以后实验有很大影响吗?
16楼2012-02-27 15:06:32
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 小咩咪 at 2012-02-27 15:06:32:
我想问个问题,WR工作液是50:1配制。说明书上写适量配制,我一次把50ml工作液都配了,配好的WR工作液能保存多久。会对以后实验有很大影响吗?

配了保存时间会变短的,好像是一周,我忘了。应该现用现配的。
17楼2012-02-27 17:49:55
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小咩咪

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
17楼: Originally posted by nicknelson at 2012-02-27 17:49:55:
配了保存时间会变短的,好像是一周,我忘了。应该现用现配的。

好吧,我就知道我杯具了。好像是低温保存一周......
18楼2012-02-27 20:39:04
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xiayu2010

金虫 (初入文坛)


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请问BCA试剂中试剂A的各溶液比例是多少?我想自己配,因为没有酶标仪,只能用分光光度计了,另外如果我想配成50ml测,每个试剂加多少?谢谢
还有啊,BCA试剂和待测样不按比例的后果是什么?待测样又是多少比例呢?
19楼2012-03-09 14:35:26
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匿名

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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20楼2012-10-30 16:48:50
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