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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于BCA法测量蛋白质浓度。
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
可是看碧云天的500次200多块钱，还是自己配试剂便宜啊。关键每次还要做标准线，比较费。我的就是纯化玩的蛋白，而且经过脱盐了，应该就是正常PBS的盐浓度，不算高吧？
引用回帖:
Originally posted by chenjpro at 2010-06-09 13:01:14:
个人觉得BCA法用于纯度高的蛋白测定比较准确。如果是杂质多，结果可能有偏差。。。（如发酵液测定）

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11楼2010-06-09 14:18:24
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lansha8331

无虫 (小有名气)
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蛋白浓度测定的，有好几种方法吧，常规Lowry法，bradford法，BCA法，其中以BCA法灵敏度最高，威格拉斯公司有卖，灵敏度5-2500ug/mL
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12楼2010-06-09 16:33:43
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zengfuxing

银虫 (小有名气)
★
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amisking:能够出实验结果那就是王道。 2010-06-09 19:36:05
听我们实验室的牛人师兄说国际上比较承认的方法现在只有BCA法。其它的方法都没这个稳定。不过不能用于测含还原剂的蛋白。生工现在出了一种BCA试剂，可用于测含低浓度还原剂的蛋白浓度。不过用起来很麻烦。
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13楼2010-06-09 19:23:23
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zengfuxing

银虫 (小有名气)
不用每次做标准曲线的，做一次拟合出计算公式就好了。
引用回帖:
Originally posted by nicknelson at 2010-06-09 14:18:24:
可是看碧云天的500次200多块钱，还是自己配试剂便宜啊。关键每次还要做标准线，比较费。我的就是纯化玩的蛋白，而且经过脱盐了，应该就是正常PBS的盐浓度，不算高吧？
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14楼2010-06-09 19:25:16
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
BCA法不用每次都做标准曲线吗？
引用回帖:
Originally posted by zengfuxing at 2010-06-09 19:23:23:
听我们实验室的牛人师兄说国际上比较承认的方法现在只有BCA法。其它的方法都没这个稳定。不过不能用于测含还原剂的蛋白。生工现在出了一种BCA试剂，可用于测含低浓度还原剂的蛋白浓度。不过用起来很麻烦。

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15楼2010-06-11 00:10:36
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小咩咪

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 李鹏举 at 2010-06-09 10:23:06:
BCA法测蛋白质还是比较准确的，所用试剂可以自己配置 BCA工作液在sigma有卖，我们用的就是那的。用之前需要配置WR工作液，50：1的比例加入BCA工作液和硫酸铜。但是注意有些缓冲溶液对BCA的颜色反应有干扰。

我想问个问题，WR工作液是50:1配制。说明书上写适量配制，我一次把50ml工作液都配了，配好的WR工作液能保存多久。会对以后实验有很大影响吗？
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16楼2012-02-27 15:06:32
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 小咩咪 at 2012-02-27 15:06:32:
我想问个问题，WR工作液是50:1配制。说明书上写适量配制，我一次把50ml工作液都配了，配好的WR工作液能保存多久。会对以后实验有很大影响吗？

配了保存时间会变短的，好像是一周，我忘了。应该现用现配的。
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17楼2012-02-27 17:49:55
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小咩咪

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
17楼: Originally posted by nicknelson at 2012-02-27 17:49:55:
配了保存时间会变短的，好像是一周，我忘了。应该现用现配的。

好吧，我就知道我杯具了。好像是低温保存一周......
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18楼2012-02-27 20:39:04
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xiayu2010

金虫 (初入文坛)
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请问BCA试剂中试剂A的各溶液比例是多少？我想自己配，因为没有酶标仪，只能用分光光度计了，另外如果我想配成50ml测，每个试剂加多少？谢谢
还有啊，BCA试剂和待测样不按比例的后果是什么？待测样又是多少比例呢？
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19楼2012-03-09 14:35:26
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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20楼2012-10-30 16:48:50
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