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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-02 17:29:55
反应体系中不用加过氧化氢。要知道酶活的值不是一个固定的值，每个人都测定结果可能都不一样，不要认为厂家标的数字就是正确的，酶活测定影响因素太多，控制在一定范围内就可以了
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11楼2010-06-02 00:26:49
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死掉的洋葱

新虫 (初入文坛)
反应体系中没有加过氧化氢，加的是过氧化氢酶（辣根过氧化物酶）
我们每次生产的时候，是要加入一定的活力单位的葡萄糖氧化酶到我们的体系中，如果不测酶活的话，我是得不到准确的葡萄糖氧化酶加入量的。
所以现在需要一种比较准确的测试葡萄糖氧化酶酶活的方法，您有什么具体的方法吗？
我现在对刚购买的葡萄糖氧化酶进行酶活测试，因为刚购买的测试酶活肯定和厂家瓶身上标记的酶活比较接近，可是我现在用我的方法测试出来却只有瓶身上标记酶活的75%左右，这个肯定是不对！
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12楼2010-06-02 13:52:35
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化一

铁杆木虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主的情况我也遇到过，现在正在用滴定法尝试，希望能得到满意的结果。
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这是一个新的开始
13楼2010-06-02 19:48:16
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zxhong

金虫 (正式写手)
学习了
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14楼2012-01-13 10:56:18
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梦幻森林

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
求楼主外文文献，小弟最近也在测酶活，一直没有找到一个合适的方法，4-氨基安替比林比色法，但是一直没有合适的参考文献来增加说服力，希望楼主给发一下  180259600@qq.com，谢谢！
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天道酬勤
15楼2014-03-12 14:45:23
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Finisterre

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 死掉的洋葱 at 2010-05-27 10:35:04
我使用的检验原理是：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成D-吡喃葡萄糖酸-1,5-内酯以及过氧化氢。就是利用反应生成的过氧化氢将还原性染料（邻联茴香氨）转化为氧化性染料，反应条件是25摄氏度，pH为7.0。
检测方法是 ...

你好~ 想请问一下 你的过氧化氢溶液浓度要是多大的呢？ 第一次做 没有经验 谢谢(*^__^*)
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16楼2014-08-05 17:34:35
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xsxj36

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 死掉的洋葱 at 2010-05-26 15:56:47
测定前的标准曲线，这个还真没有，我是将底物在25摄氏度的水浴环境中平衡5分钟，然后加入稀释过的葡萄糖氧化酶溶液，放入分光光度计中反应5分钟，每分钟记录吸光度值，然后做一条曲线，根据曲线得出吸光度值每分钟 ...

请问下，为什么要测酶活呢，买酶的时候不是会有个大概的酶活吗？比如≥15,000U/g，一定得计算出具体的酶活吗？
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坚持，坚持，再坚持！
17楼2014-11-22 16:52:59
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123yang_1234

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
氧化酶的活性变化很大，时间等因素会对其有很大的影响
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撸起袖子好好干
18楼2016-03-11 16:13:55
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