【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法 - 分子生物 - 综合其他

11楼2010-06-02 00:26:49

死掉的洋葱

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反应体系中没有加过氧化氢，加的是过氧化氢酶（辣根过氧化物酶）
我们每次生产的时候，是要加入一定的活力单位的葡萄糖氧化酶到我们的体系中，如果不测酶活的话，我是得不到准确的葡萄糖氧化酶加入量的。
所以现在需要一种比较准确的测试葡萄糖氧化酶酶活的方法，您有什么具体的方法吗？
我现在对刚购买的葡萄糖氧化酶进行酶活测试，因为刚购买的测试酶活肯定和厂家瓶身上标记的酶活比较接近，可是我现在用我的方法测试出来却只有瓶身上标记酶活的75%左右，这个肯定是不对！

12楼2010-06-02 13:52:35

化一

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楼主的情况我也遇到过，现在正在用滴定法尝试，希望能得到满意的结果。

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这是一个新的开始

13楼2010-06-02 19:48:16

zxhong

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学习了

14楼2012-01-13 10:56:18

梦幻森林

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求楼主外文文献，小弟最近也在测酶活，一直没有找到一个合适的方法，4-氨基安替比林比色法，但是一直没有合适的参考文献来增加说服力，希望楼主给发一下 180259600@qq.com，谢谢！

天道酬勤

15楼2014-03-12 14:45:23

Finisterre

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 死掉的洋葱 at 2010-05-27 10:35:04
我使用的检验原理是：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成D-吡喃葡萄糖酸-1,5-内酯以及过氧化氢。就是利用反应生成的过氧化氢将还原性染料（邻联茴香氨）转化为氧化性染料，反应条件是25摄氏度，pH为7.0。
检测方法是 ...

你好~ 想请问一下你的过氧化氢溶液浓度要是多大的呢？第一次做没有经验谢谢(*^__^*)

16楼2014-08-05 17:34:35

xsxj36

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引用回帖:

5楼: Originally posted by 死掉的洋葱 at 2010-05-26 15:56:47
测定前的标准曲线，这个还真没有，我是将底物在25摄氏度的水浴环境中平衡5分钟，然后加入稀释过的葡萄糖氧化酶溶液，放入分光光度计中反应5分钟，每分钟记录吸光度值，然后做一条曲线，根据曲线得出吸光度值每分钟 ...

请问下，为什么要测酶活呢，买酶的时候不是会有个大概的酶活吗？比如≥15,000U/g，一定得计算出具体的酶活吗？

坚持，坚持，再坚持！

17楼2014-11-22 16:52:59

123yang_1234

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氧化酶的活性变化很大，时间等因素会对其有很大的影响

撸起袖子好好干

18楼2016-03-11 16:13:55