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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-13 10:01:34:
肯定会影响,多大就不知道了。我一般晾的特别干。。。

晾个十几分中就差不多,我一般去吃饭去了,回来后溶解离心回收,呵呵!
我看他们有的在通风处里抽干,10分钟足以
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
11楼2010-05-13 11:19:37
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hflf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-13 11:19:37:

晾个十几分中就差不多,我一般去吃饭去了,回来后溶解离心回收,呵呵!
我看他们有的在通风处里抽干,10分钟足以

谢谢!
行到水穷处,坐看云起时!
12楼2010-05-13 11:35:31
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yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
[quote]Originally posted by liyong1981 at 2010-05-13 09:43:33:
大家讨论下啊,这连接有时候连不上,怎么回事呢,我们都是目测浓度,没有测DNA的仪器~ [
跑个电泳 跟MARKER的亮度对比一下就大概知道浓度了
13楼2010-05-13 12:40:35
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
晾干?在离心机中高速开盖离心3min就OK了。
仕不可不弘毅,任重而道远
14楼2010-05-13 15:18:22
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cqyniu

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by cqyniu at 2010-05-13 11:01:05:
有影响的,还有乙醇会影响连接酶的活性的,你回收最后一步没有空离吗?

一般都没有问题的啊,我没有用TE溶,只用了ddH2O,回收片段大的话就把水加热一下。
15楼2010-05-13 20:55:37
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般额外空离两分钟就足以,我从来不晾干的,从来没有因为这个而不长菌
我感觉你这个不长菌,主要影响不是这个,如果你之前的实验都很好,那么我感觉可能是这次回收的片段本身的原因,浓度、长度等更值得分析一下。
16楼2010-05-13 23:09:48
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

假如想知道确切的原因,就是重新将得到的DNA纯化,(这次记得晾干),然后再连接,如果还不成功,就说明晾不太干也不一定有问题;若成功,说明的确是没晾干的问题了,以后要多多注意了
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
17楼2010-05-13 23:52:04
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pororo911

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议到37℃培养箱烘个20分钟就ok了
18楼2010-05-13 23:57:19
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liyong1981

金虫 (正式写手)


同意楼上几位的观点~
19楼2010-05-14 08:41:32
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liyong1981

金虫 (正式写手)


建议楼主多给大家金币~
20楼2010-05-14 11:56:14
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