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LYZX

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[交流] 【求助/交流】克隆做M13检测后为何出现多重条带??? 已有1人参与


如图,M13检测后,目标条带应该在300bp的位置,但是500bp处也有条带,而且几乎所有样都出现这种情况,送去测序也失败了。用的是500bp的MRAK。请问,这是怎么回事啊?切胶纯化用的是takara 的试剂盒。
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

LYZX(金币+1): 2010-10-01 16:20:33
你用的什么质粒,目标片段在300处是加上载体在引物间的片段后的总大小吗?

你这个菌落PCR的退火温度是多少,感觉应该升温

另外你这个胶太脏了,弄干净点,聚焦也没有聚好,拍得有点模糊,背景也不要这么白,调黑一点,对比度大一点

maker一道一道交代一下,500的用的人也不是很多

切胶纯化是指你之前克隆使用的片段吗?
2楼2010-05-08 18:49:56
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