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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求pKD46质粒
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panlook

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求pKD46质粒 已有2人参与

我师弟从老外那买了个pKD46  我一直在鉴定测序  可就是检测不出来是否是pKD46 送了好多地方 就是测序测不出来
而现在实验也一直不成功  不知道是否是质粒的原因，
有pKD46的同学能否联系我一下  可以用实验室质粒换  也可以适当出点钱购买  谢谢~~~~~
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1楼 2010-05-05 10:01:05
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
引用回帖:
Originally posted by panlook at 2010-05-05 10:01:05:
我师弟从老外那买了个pKD46  我一直在鉴定测序  可就是检测不出来是否是pKD46 送了好多地方 就是测序测不出来
而现在实验也一直不成功  不知道是否是质粒的原因，
有pKD46的同学能否联系我一下  可以用实验室质 ...

你的质粒OK了吗？
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
2楼2010-10-07 22:16:17
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prthefu

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，不知pKD46质粒测序验证这一步，你是怎么解决的呢？

我最近也在做敲除，用到pKD46质粒。但是我买来pKD46甘油菌后，划线、挑单克隆、提质粒，然后就是测序验证。
但是，我一直卡在了质粒测序验证这一步。我多次提取，测序引物为自己设计，选的质粒上前后两段，
单独菌落pcr已经验证过可以扩出条带，但是把质粒和引物送公司测序后就一直测序失败。
给的理由是引物结合不上或是治理不纯等。
所以想请教楼主，能否指点一下，质粒验证这一步，我还要怎么做呢。真的没招了，在这上面也已经耽误好长时间了。
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
3楼2019-09-23 08:55:21
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