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luckyyxy

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】有关FITC方面的问题

荧光标记蛋白质的时候,按照说明书上的做,里面F/P的值多少合适?
说明书上写的是:
蛋白浓度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495 ] / 1.4
F/P比例: 3.1×A495 / [A280 – 0.31×A495 ],该值应介于2.5~6.5之间。

但是我在其他地方看到有这样的公式,是通用公式
C = (Mw* E%0.1)/(389*195)
F/P = A495*C / (A280 -0.35*A495)
E0.1% is the absorption at 280 nm of a protein at 1.0 mg/mL
MW is the molecular weight of the protein.
请问下我该按照哪个计算?以前没有做过这方面的实验。
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