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sunqx

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】七个月从无到有获得棉花转基因苗? 已有5人参与

我是做花生遗传转化工作的,已经一年多了,花生再生体系还没有建立起来,
今天听老师说,有个学生,用了不到七个月,就从实验室一点基础没有,获得了转基因棉花的苗。并且还是好几个基因的不同转基因植株。
自己内心很受鼓舞,但是也感觉自己真的很笨。
大家有什么好的关于做组培的建议吗?
重金感谢。
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sunqx

木虫 (著名写手)

2楼2010-04-23 21:11:14
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

sunqx(金币+5): 2010-04-27 18:58
这个不好说啊。有时候还是要看一点运气的。

不过七个月能把棉花做出来,除了运气非一般的好之外,自身的努力绝对是不能忽视的!
3楼2010-04-27 11:06:43
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

sunqx(金币+5): 2010-04-27 21:26
建议楼主先建立起非转基因外植体再生的体系,然后用这种条件来做转基因。

重点是基因型和激素组合!

-------
补充一句,就我所知目前最快能得到转基因棉花苗也要6-8个月(体细胞胚胎发生途径,从转化开始到形成正常苗)

[ Last edited by dfl204 on 2010-4-28 at 10:40 ]
4楼2010-04-27 19:33:48
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sunqx

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-04-27 19:33:48:
建议楼主先建立起非转基因外植体再生的体系,然后用这种条件来做转基因。

重点是基因型和激素组合!

-------
补充一句,就我所知目前最快能得到转基因棉花苗也要6-8个月(从转化开始到形成正常苗)

谢谢你, 我一直在摸索非转基因外植体再生,每次都不是很稳定。能再生出来,但是效率不是很高。
5楼2010-04-27 21:26:58
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

呵呵 !!惭愧 本人就是做转基因棉花的!我们这两个月的任务就是,三个人转三个株系得到2000株转基因棉花,筛后至少有60株阳性!一个月了已转了600了!我们做的是茎尖转化法,
wuwei_hello@163.com
6楼2010-04-28 09:23:47
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-04-28 09:23:47:
呵呵 !!惭愧 本人就是做转基因棉花的!我们这两个月的任务就是,三个人转三个株系得到2000株转基因棉花,筛后至少有60株阳性!一个月了已转了600了!我们做的是茎尖转化法,

可不可以理解为预期的转化植株阳性率要达到3%?通过什么方法检测,southern?如果是PCR,是不是有可能会是农杆菌或质粒残留引起的假阳性?

共同交流,相互学习!
7楼2010-04-28 10:40:21
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-04-28 10:40:21:


可不可以理解为预期的转化植株阳性率要达到3%?通过什么方法检测,southern?如果是PCR,是不是有可能会是农杆菌或质粒残留引起的假阳性?

共同交流,相互学习!

没!转化率在4%-5%左右吧!通过抗除草剂筛选、以及pCR检测!
wuwei_hello@163.com
8楼2010-04-28 11:01:36
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

呵呵 !大家可以讨论讨论 !!
wuwei_hello@163.com
9楼2010-04-28 11:07:18
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骚人追月

金虫 (小有名气)

sunqx(金币+1): 2010-05-01 21:23
大家都来讨论讨论,我也准备转花生呢。不知道能不能学到一些东西。
会做饭就会做实验?
10楼2010-04-29 16:37:00
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