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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 【求助/交流】七个月从无到有获得棉花转基因苗？
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sunqx

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】七个月从无到有获得棉花转基因苗？ 已有5人参与

我是做花生遗传转化工作的，已经一年多了，花生再生体系还没有建立起来，
今天听老师说，有个学生，用了不到七个月，就从实验室一点基础没有，获得了转基因棉花的苗。并且还是好几个基因的不同转基因植株。
自己内心很受鼓舞，但是也感觉自己真的很笨。
大家有什么好的关于做组培的建议吗？
重金感谢。
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1楼 2010-04-19 22:30:39
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sunqx

木虫 (著名写手)
2楼2010-04-23 21:11:14
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
sunqx(金币+5): 2010-04-27 18:58
这个不好说啊。有时候还是要看一点运气的。

不过七个月能把棉花做出来，除了运气非一般的好之外，自身的努力绝对是不能忽视的！
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3楼2010-04-27 11:06:43
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
sunqx(金币+5): 2010-04-27 21:26
建议楼主先建立起非转基因外植体再生的体系，然后用这种条件来做转基因。

重点是基因型和激素组合！

-------
补充一句，就我所知目前最快能得到转基因棉花苗也要6-8个月（体细胞胚胎发生途径，从转化开始到形成正常苗）

[ Last edited by dfl204 on 2010-4-28 at 10:40 ]
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4楼2010-04-27 19:33:48
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sunqx

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-04-27 19:33:48:
建议楼主先建立起非转基因外植体再生的体系，然后用这种条件来做转基因。

重点是基因型和激素组合！

-------
补充一句，就我所知目前最快能得到转基因棉花苗也要6-8个月（从转化开始到形成正常苗）

谢谢你， 我一直在摸索非转基因外植体再生，每次都不是很稳定。能再生出来，但是效率不是很高。
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5楼2010-04-27 21:26:58
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
呵呵 ！！惭愧 本人就是做转基因棉花的！我们这两个月的任务就是，三个人转三个株系得到2000株转基因棉花，筛后至少有60株阳性！一个月了已转了600了！我们做的是茎尖转化法，
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wuwei_hello@163.com
6楼2010-04-28 09:23:47
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-04-28 09:23:47:
呵呵 ！！惭愧 本人就是做转基因棉花的！我们这两个月的任务就是，三个人转三个株系得到2000株转基因棉花，筛后至少有60株阳性！一个月了已转了600了！我们做的是茎尖转化法，

可不可以理解为预期的转化植株阳性率要达到3%？通过什么方法检测，southern?如果是PCR，是不是有可能会是农杆菌或质粒残留引起的假阳性？

共同交流，相互学习！
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7楼2010-04-28 10:40:21
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-04-28 10:40:21:


可不可以理解为预期的转化植株阳性率要达到3%？通过什么方法检测，southern?如果是PCR，是不是有可能会是农杆菌或质粒残留引起的假阳性？

共同交流，相互学习！

没！转化率在4%-5%左右吧！通过抗除草剂筛选、以及pCR检测！
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wuwei_hello@163.com
8楼2010-04-28 11:01:36
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
呵呵 ！大家可以讨论讨论 ！！
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wuwei_hello@163.com
9楼2010-04-28 11:07:18
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骚人追月

金虫 (小有名气)
sunqx(金币+1): 2010-05-01 21:23
大家都来讨论讨论，我也准备转花生呢。不知道能不能学到一些东西。
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会做饭就会做实验？
10楼2010-04-29 16:37:00
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