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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Native电泳会不会使蛋白亚基分开？
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seeyou0

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】Native电泳会不会使蛋白亚基分开？ 已有4人参与

我的蛋白经过离子交换和分子筛过柱后，SDS和Native电泳都有2条条带，分子量相差40kDa，很难解释为什么分子筛分不开它们。
所以我想会不会原本是一个蛋白质复合体，但是Native电泳时把亚基分开了？
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1楼 2010-04-19 17:34:04
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daocaoren6738

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 2010-04-20 22:17
这两种蛋白质的等电点可能很相相似.分子筛我觉得只有除盐效果比较好,在分离相差40的蛋白质不一定合适
也要看蛋白质是球状还是长条状的,在进出分子筛的孔,是否方便.才好分离.
我觉得应该再采用一些别的分离柱分离
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2楼2010-04-20 10:21:05
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
蛋白质四级结构是由非共价键（离子键，氢键等）维持，如果作用力比较弱，则通过分子筛或电泳时，是有断裂的可能的

不排除你的纯化出了问题
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3楼2010-04-20 11:33:32
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
分子筛要是一个峰那还说明这两个复合物结合的非常紧密。其实native和分子筛是很接近的。呵呵，如果能拿到一个复合物其实也是挺好，我想找复合物还找不到。
你可以尝试高盐下看看会不会解聚，试试吧，不确定。
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4楼2010-04-20 12:15:41
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guoenwen

金虫 (小有名气)
分子筛分离的蛋白是和蛋白空间结构相关的，即使分子量相差很大的蛋白液可能一起出来，只要疏水球半径一样就可以啊。
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5楼2010-04-20 19:37:10
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