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Flairy825

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何提取植物根 茎 叶的蛋白 已有2人参与

请问大家有好的提植物组织蛋白的方法没?多谢了
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

lstt09nk:楼主是新手,难免有些不懂的,回帖要客气一点哈~~~ 2010-04-18 19:03
你查阅相关文献不就知道了!笨!
大家共同交流、共同提高!!!
2楼2010-04-18 15:55:32
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poog502

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
考马斯亮蓝测定可溶性是植物生理实验最常用的方法... ....
叶片可溶性蛋白的含量测定
1【方法步骤】
取新鲜植物叶片,去掉中脉,剪成碎片,称取鲜叶0.5g左右,用5ml 蒸馏水研磨成匀浆后,于4000转/分钟离心10分钟。取上清液1.0ml 放入试管中,加入5ml考马斯亮蓝G-250溶液,充分混合,放置2分钟后在595nm下比色,测定吸光度。
2【试剂配制】
考马斯亮蓝G-250: 称取100mg考马斯亮蓝G-250,溶于50ml90%的乙醇中,加入85%(W/V)的磷酸100ml,再用蒸馏水定容到1000ml,贮于棕色瓶中,常温下可保存一个月。
3【计算公式】
蛋白质标准曲线: C=12.1655ABS-0.863,C为蛋白质含量,ABS为试验测定的吸光度。
样品中蛋白质含量(mg/g)=C×VT×VS×WF×1000      
式中C为查标准曲线值,VT为提取液总体积,VS为测定时加样量,为样品鲜重.
3楼2010-04-19 07:35:57
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