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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】荧光滴定法测结合常数
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tamohawkgq

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】荧光滴定法测结合常数 已有4人参与

最近做小分子和DNA的结合实验，需要用荧光滴定法测二者的结合常数，但文献报道的都很简单模糊，且貌似要解二元二次方程组。那位大侠知道相关方法或软件，在下不胜感激。
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1楼 2010-04-15 17:30:02
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prettypigeon522

铁杆木虫 (著名写手)
研究DNA和小分子结合一定很有意思吧，有空交流一下，我的qq是77326736
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3楼2010-04-17 14:51:02
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宁宁珲

银虫 (初入文坛)
tamohawkgq(金币+2): 2010-04-17 16:41
测定结合常数和结合位点数的理论公式最常用的是Scatchard 方程：
log[(IoF-IF)/ IF]=logKA+nlog[Q]    (F，A均为下标)
IoF指没有猝灭剂时的荧光强度；IF指加入了猝灭剂的荧光强度，KA为对应的结合常数，Q为你所测物质的浓度（发荧光的物质），n为结合位点数。
一般光谱期刊的文献都有的
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2楼2010-04-17 09:37:12
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tamohawkgq

木虫 (正式写手)

结合常数

呵呵，你提供得是那个最简单得公式，这个公式最大得缺点是式中没有体现荧光物质得浓度，不过还是很感谢。而对静态淬灭而言，荧光物质得浓度直接与F0/F有关，所以用这个公式会产生较大得误差，现在大家都用另外一个公式，公式中体现了荧光物质得浓度，不知谁知道利用这个公式通过荧光滴定曲线求解结合常数。
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4楼2010-04-17 16:48:17
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)

楼上的说的对

楼上的说的对，就是那个公式。还有你要确定结合是不是特异性的
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5楼2010-04-19 11:42:05
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