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【求助】大孔树脂
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sunnypaine
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【求助】大孔树脂
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大孔树脂上样后水洗,水洗后到底是把水放到树脂床面还是把水放尽,再用乙醇洗脱啊?
如何避免气泡啊,我发现上样流速好控制,但是乙醇流速很难控制,速度总是提不上来。
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2010-04-15 15:08:15
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karl2100(金币+1):谢谢回复! 2010-04-15 22:33
放到树脂床面就加乙醇,不能放干,放干就有很多气泡了。加流动相的时候小心点,不要把大孔冲起来,或者上面加棉花都可以避免气泡。记得一定不要跑干,干了就肯定会有气泡了
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2010-04-15 15:21:03
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可是如果这样的话,那我用乙醇洗脱时,最先流出来的就是柱中的水洗除杂部分了,这样我收集的洗脱液中有一部分就是水洗除杂的液体了。
那我到底应该如何收集醇洗脱液
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2010-04-15 15:58:00
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karl2100(金币+1):3Q 2010-04-15 22:34
呵呵,大孔有气泡正常,其实你可以放干的,气泡不影响你的柱子,我现在就在用大孔,效果还行的。
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2010-04-15 16:00:04
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Originally posted by
sunnypaine
at 2010-04-15 15:58:00:
可是如果这样的话,那我用乙醇洗脱时,最先流出来的就是柱中的水洗除杂部分了,这样我收集的洗脱液中有一部分就是水洗除杂的液体了。
那我到底应该如何收集醇洗脱液
呵呵,那就放干吧,可以的,这样除杂效果不错,你也可以把第一个保留体积的醇洗成分弃之
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5楼
2010-04-15 16:02:10
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karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-04-15 22:35
你可以估计一下保留体积
在由水换成醇洗脱时有个替换的过程,这个保留体积的液体其实还是水,可以归到水洗脱部分里
一个保留体积后收集的就是乙醇洗脱物了
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欢迎您来药学版~
6楼
2010-04-15 16:36:58
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Originally posted by
sunnypaine
at 2010-04-15 15:58:00:
可是如果这样的话,那我用乙醇洗脱时,最先流出来的就是柱中的水洗除杂部分了,这样我收集的洗脱液中有一部分就是水洗除杂的液体了。
那我到底应该如何收集醇洗脱液
就像上面两位说的,你可以先把醇洗脱的第一个保留体积弃掉,接后面的就行,或者你就直接闻接下来的样品,有醇味儿了就是醇洗脱的了
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7楼
2010-04-15 16:56:06
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karl2100(金币+1):谢谢应助! 2010-04-15 22:36
我个人看法是不能放干,放到树脂平面就行了,如果放干会产生很多气泡,在柱子中形成液膜阻力和产生沟流,这样会大大增加你的乙醇用量,而且洗脱效果也不好。你洗杂的体积和效果足够的话,柱内剩下的那点水是不会有什么影响的,实在你要求高通过检测把,柱内水的部分分开收集就可以了。
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2010-04-15 17:30:16
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关于流速控制问题
我用的是沙芯柱,洗脱的时候发现流速没法控制,就算是阀门打到最大,流速也上不去?
是不是沙心对流速产生影响了?还有所谓的2BV/h,是只要求一个小时内流完2BV即可,还是换算成每分钟液滴数来控制?
xiexie
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10楼
2010-04-15 22:42:16
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