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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】稀释涂布的注意事项
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tzaixmc

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】稀释涂布的注意事项 已有4人参与

最近在做稀释涂布技术，但是老是出现一些解释不了的问题，比如说同一个稀释度的不同平板差好多，涂布前都有已经振荡过了，然后两个稀释度不成比例，比如10*-3是300个，10*-4应该是30个左右，但是出来可能有80个。稀释和涂布过程中关于混匀我觉得已经够小心的了，只是本人有个习惯就是试管口会过火焰，这样取菌的时候是不是会被烫死，涂布棒凉到手摸上去温温的会把菌烫死吗？
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1楼 2010-04-14 15:20:04
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j2

木虫 (正式写手)
做稀释的时候混匀，而且稀释倍数不要高了
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2010-04-14 16:09:27
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jingcp200320

银虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1): 2010-04-14 18:17
tzaixmc(金币+1): 2010-04-30 15:16
涂布棒凉到手摸上去温温的肯定过不会把菌烫死。  稀释梯度的时候一定要仔细混匀，然后吸的时候不要枪头上有沾着的，仔细点就应该没有问题！
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2楼2010-04-14 15:26:10
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售
★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-04-15 08:13
tzaixmc(金币+1): 2010-04-30 15:16
稀释的时候一定要记得要换管。摇匀更重要了。

而且结果不成梯度也很正常。没那么顺的。 梯度只是理论的。


菌生长可不一样了。

想要好点的结果，可以选择比较好的梯度。并非10
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4楼2010-04-14 22:20:06
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
tzaixmc(金币+3): 2010-04-30 15:15
稀释的倍数越大，菌含量越少，就越不成比例，这是很正常的。

还有就是稀释到10*-3才300个的话，你的菌悬液的菌含量是很低的，可以试试把稀释的梯度减小一点，比如用5倍稀释，看平板计数会不会呈现5倍的梯度。涂布棒温度也不能超过50度，最好在40度以下。不然影响肯定很大。灼烧灭菌过后的涂布棒可以现在菌液管的管壁或培养基上靠靠，等凉了后在进行。

另外你提到的试管口过火焰是很正常的，而且操作的时候也要尽量在灯焰附近，避免有杂菌。小心一点的话，是不会有影响的。
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今夜的寂寞，让我如此美丽。
5楼2010-04-16 09:46:45
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