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tzaixmc

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】稀释涂布的注意事项 已有4人参与

最近在做稀释涂布技术,但是老是出现一些解释不了的问题,比如说同一个稀释度的不同平板差好多,涂布前都有已经振荡过了,然后两个稀释度不成比例,比如10*-3是300个,10*-4应该是30个左右,但是出来可能有80个。稀释和涂布过程中关于混匀我觉得已经够小心的了,只是本人有个习惯就是试管口会过火焰,这样取菌的时候是不是会被烫死,涂布棒凉到手摸上去温温的会把菌烫死吗?
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j2

木虫 (正式写手)

做稀释的时候混匀,而且稀释倍数不要高了
修炼ing,当虫仙……
3楼2010-04-14 16:09:27
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jingcp200320

银虫 (小有名气)


1949stone(金币+1): 2010-04-14 18:17
tzaixmc(金币+1): 2010-04-30 15:16
涂布棒凉到手摸上去温温的肯定过不会把菌烫死。  稀释梯度的时候一定要仔细混匀,然后吸的时候不要枪头上有沾着的,仔细点就应该没有问题!
2楼2010-04-14 15:26:10
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统(国产)销售


★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-04-15 08:13
tzaixmc(金币+1): 2010-04-30 15:16
稀释的时候一定要记得要换管。摇匀更重要了。

而且结果不成梯度也很正常。没那么顺的。 梯度只是理论的。


菌生长可不一样了。

想要好点的结果,可以选择比较好的梯度。并非10
4楼2010-04-14 22:20:06
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)

tzaixmc(金币+3): 2010-04-30 15:15
稀释的倍数越大,菌含量越少,就越不成比例,这是很正常的。

还有就是稀释到10*-3才300个的话,你的菌悬液的菌含量是很低的,可以试试把稀释的梯度减小一点,比如用5倍稀释,看平板计数会不会呈现5倍的梯度。涂布棒温度也不能超过50度,最好在40度以下。不然影响肯定很大。灼烧灭菌过后的涂布棒可以现在菌液管的管壁或培养基上靠靠,等凉了后在进行。

另外你提到的试管口过火焰是很正常的,而且操作的时候也要尽量在灯焰附近,避免有杂菌。小心一点的话,是不会有影响的。
今夜的寂寞,让我如此美丽。
5楼2010-04-16 09:46:45
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