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【求助】求助:为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液?已有3人参与
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准确称取于120℃干燥至恒重的无水芦丁(作黄酮标准对照)9.5 mg,用60%的乙醇定容于50mL容量瓶中,摇匀,得到浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,作为贮备液备用。准确量取此液0.0、1.0、2.0、3.0、 4.0、5.0、6.0、7.0 mL于25 mL容量瓶中,分别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL, 放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,分别用30%的乙醇稀释至刻度,混匀,放置16min。用紫外分光光度计在510 nm处测定吸光度。 如上述显色实验,为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,而不是其他浓度(多少浓度范围内遵循朗伯比尔定律?)。别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL, 显色原理是什么,各溶液用量有什么要求? 各溶液用量之间是否有内在关系? 显色时间有什么要求? 还有就是混匀,放置16min 为什么要放置16min?如何放置?在容量瓶中放置?容量瓶塞需打开还是塞上? 还有就是在做实验中 植物黄酮提取,显色后,进紫外分光光度计测量时,分光度总是跳动不稳定。老师说需离心,究竟离心的目的是什么?难道是沉淀 Al(no3)3? 不过离心后 含试样的溶液 会有好多沉淀,而参比液几乎没有沉淀,沉淀是什么物质,是否含有大量黄酮类物质,从而影响实验准确度? 究竟 如何解决A值跳动的症状(紫外分光光度计没问题)? 还有就是显色溶液是否要现用现配,是否用量,及其浓度都要精密控制? 还有就是吸光度测量的重复试验,每份重复三次,指的是需重新取样提取黄酮物质,再显色测吸光度,还是显色过后,取试液与三比色皿中,测量三次吸光度? 还有就是稳定性实验,为什么要做? 我是一名学生,刚刚入手实验,有很多不明白的地方,请各位前辈不吝赐教, 还有就是想各位前辈能给些此类光谱测定的参考资料及经验,十分感谢! |
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