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wolfmanh

[交流] 【求助】求助:为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液?已有3人参与

准确称取于120℃干燥至恒重的无水芦丁(作黄酮标准对照)9.5 mg,用60%的乙醇定容于50mL容量瓶中,摇匀,得到浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,作为贮备液备用。准确量取此液0.0、1.0、2.0、3.0、 4.0、5.0、6.0、7.0 mL于25 mL容量瓶中,分别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL, 放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,分别用30%的乙醇稀释至刻度,混匀,放置16min。用紫外分光光度计在510 nm处测定吸光度。

如上述显色实验,为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,而不是其他浓度(多少浓度范围内遵循朗伯比尔定律?)。别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,  显色原理是什么,各溶液用量有什么要求? 各溶液用量之间是否有内在关系?  显色时间有什么要求?  还有就是混匀,放置16min   为什么要放置16min?如何放置?在容量瓶中放置?容量瓶塞需打开还是塞上?
还有就是在做实验中  植物黄酮提取,显色后,进紫外分光光度计测量时,分光度总是跳动不稳定。老师说需离心,究竟离心的目的是什么?难道是沉淀
Al(no3)3?   不过离心后  含试样的溶液 会有好多沉淀,而参比液几乎没有沉淀,沉淀是什么物质,是否含有大量黄酮类物质,从而影响实验准确度?
  究竟 如何解决A值跳动的症状(紫外分光光度计没问题)?
还有就是显色溶液是否要现用现配,是否用量,及其浓度都要精密控制?
  还有就是吸光度测量的重复试验,每份重复三次,指的是需重新取样提取黄酮物质,再显色测吸光度,还是显色过后,取试液与三比色皿中,测量三次吸光度?
  还有就是稳定性实验,为什么要做?

我是一名学生,刚刚入手实验,有很多不明白的地方,请各位前辈不吝赐教,
还有就是想各位前辈能给些此类光谱测定的参考资料及经验,十分感谢!
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wolfmanh

怎么没朋友回答我?
2楼2010-04-13 13:42:40
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wolfmanh

怎么没有谁知道??
3楼2010-04-13 16:54:01
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-04-15 13:48
首先,标准浓度可能是长期实验得到的最佳的,适于计算。至于朗定律,理论上说任何浓度都符合,所谓三次就是同样的实验做三次,测,以保证准确。至于稳定性,没什么可说的,当然要测。劝你以后不要问这么多,因为在这里的人大多很忙,很少有人有兴趣全读完它。所以问题尽量少,简短。如果问题多就多发几个贴子。我就能回这么多了。
4楼2010-04-14 19:41:34
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happyjoys

木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-04-15 19:13
如上述显色实验,为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,而不是其他浓度

如楼上的所说,这是长期实验摸索出来的,这个范围内吸光度的大小刚好合适撒!

显色的原理就不用说了,一般是形成了络合物,它在某波长处有一最大吸收了。不同物质的显色时间不一样了。
I love English , that's why I'm here ...
5楼2010-04-15 15:04:43
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