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【求助/交流】关于质粒拷贝数的问题已有3人参与
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我最近在做一个点突变的实验，先用一个空载体连接一个目的基因，然后需要在目的基因的指定位点制作点突变，我用的是trangen的fastpfu点突变试剂盒，做完之后测序结果发现确实是在指定位点突变了，达到了预期目的。 但是奇怪的事情也发生了：我的空载体和连接目的基因的质粒都是高拷贝的，提出质粒来很亮，但是点突变之后的菌液提质粒就非常的弱，但是可以保证提出来了，因为测序以及pcr都能说明。提质粒的手法也保证没问题。这个实验我已经重复了2次，结果都是这样。我怀疑是菌老了，就重新划线转接，但是无济于事。请问大家问题可能出在哪里？？ |
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