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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA酶的配制
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wangshan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RNA酶的配制 已有3人参与

请问1mg/ml的RNA酶如何配制?可以直接用双蒸水配吗?
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1楼 2010-04-11 12:48:00
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whutanbo

新虫 (初入文坛)
★
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粉末溶于10mM Tris-HCl pH7.5 15mM NaCl中。终浓度10mg/mL，100摄氏度15分钟。
缓慢冷却至室温，分装后-20摄氏度保存。
用时稀释到1mg/mL浓度。
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4楼2010-04-12 11:31:17
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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1949stone(金币+2): 2010-04-11 18:50
引用回帖:
Originally posted by wangshan at 2010-04-11 12:48:00:
请问1mg/ml的RNA酶如何配制?可以直接用双蒸水配吗?

不行，直接用会产生沉淀。分子克隆上有程序，好像是现用醋酸钠溶解，100度15分钟，在加Tris-Cl（pH7.5）的缓冲液调到中性
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2楼2010-04-11 13:16:06
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-11 18:50
可以的……但用Tris buffer会更好。
也不用高温灭活DNase，除非你买的是国产的
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3楼2010-04-11 18:25:36
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by whutanbo at 2010-04-12 11:31:17:
粉末溶于10mM Tris-HCl pH7.5 15mM NaCl中。终浓度10mg/mL，100摄氏度15分钟。
缓慢冷却至室温，分装后-20摄氏度保存。
用时稀释到1mg/mL浓度。

该方法会产生沉淀。好的方法请参照分子克隆手册第三版
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5楼2010-04-12 12:02:17
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