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315767958

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】OD扫描全波长 已有3人参与

要做细菌的菌量—干重—OD曲线,不知道要用培养多长时间的发酵液去扫全波长,是用对数生长期的发酵液么,还是什么时候,请高手指点。
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-12 22:51
引用回帖:
Originally posted by 315767958 at 2010-04-10 21:12:25:
要做细菌的菌量—干重—OD曲线,不知道要用培养多长时间的发酵液去扫全波长,是用对数生长期的发酵液么,还是什么时候,请高手指点。

这个在菌体没有死亡破裂的时候都可以。

死亡破裂时候,许多菌体内容物都渗出来了,测量干重时因为要洗至少两次,都会被洗掉,这时结果就不准了。

您若能比别人深入一步,
可以做LB-葡萄糖-培养基培养 第5小时 和第 12小时的两种,(培养时需要每2-3小时调pH)

第5小时 是在指数生长末期,第12小时差不多到了静止期。

自己看看OD-DCW曲线有没有不同。

但是,一定要注意,菌体起码要洗两次!

假设培养基里的成分有 10g/L,(起码是这个重量)
你可以算算,若是不进行洗涤,1 mL发酵液会产生 10mg 非菌体干物质的量,这一般是CDW重量的几倍。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2010-04-12 07:52:06
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xue-yan1979

银虫 (小有名气)

最好是对数生长后期
2楼2010-04-11 17:45:39
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315767958

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xue-yan1979 at 2010-04-11 17:45:39:
最好是对数生长后期

多谢啊!
用干货说话
3楼2010-04-11 22:41:46
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315767958

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2010-04-12 07:52:06:


这个在菌体没有死亡破裂的时候都可以。

死亡破裂时候,许多菌体内容物都渗出来了,测量干重时因为要洗至少两次,都会被洗掉,这时结果就不准了。

您若能比别人深入一步,
可以做LB-葡萄糖-培养基培养  ...

非常非常感谢,真的是高手的经验之谈,再度感谢!
用干货说话
5楼2010-04-12 21:11:27
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