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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】关于硅胶柱层层析的梯度洗脱问题
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小叶子5501

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于硅胶柱层层析的梯度洗脱问题 已有5人参与

硅胶柱层层析的梯度洗脱问题
本人现在做的天然产物的提取分离，粗体物先用乙酸乙酯萃取了，准备用硅胶柱大体分一下段，但是怎么确定分段时候所用流动相的梯度哪？我用石油醚和丙酮跑了薄层板，物质大致集中在中等极性部位，请各位有经验的赐教。谢谢各位
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1楼 2010-04-10 19:28:45
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫
★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖！ 2010-04-11 16:38
楼主需多试几个溶剂系统
乙酸乙酯层多用氯仿-甲醇，如果嫌毒性大可用二氯甲烷-甲醇代替
具体要用薄层板试，考查其成点性好不好
我们实验室是这样的，乙酸乙酯层基本有个通用的溶剂洗脱程序：
二氯甲烷-甲醇从（100：0）开始，然后是99：1，98：2......一直到90：10，这个过程相对跑的比较细，之后就可以用85：15，80：20，70：30，60：40，50：50，如果没啥东西了就用甲醇冲柱了。
以上仅供楼主参考。
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欢迎您来药学版~
2楼2010-04-10 21:23:45
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白巧克力

铜虫 (小有名气)
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472514568(金币+1):谢谢回帖！ 2010-04-11 16:38
既然是砍断，就不用太精细，我在砍断一般是用减压砍，以9：1氯仿/甲醇开始，逐渐10%降，既8：2，7：3......
仅供参考吧
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停止堕落
3楼2010-04-10 21:45:38
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小叶子5501

金虫 (小有名气)
谢谢楼上各位的帮助，不过我有一点不是很明白，“具体要用薄层板试，考查其成点性好不好”的意思就是用什么洗脱剂要看呈点性好不好呗，就用呈点性好的展开剂作为洗脱剂被?是这个意思吗？
请各位指点谢谢！
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4楼2010-04-11 13:07:10
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westzilch

铁杆木虫 (著名写手)
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472514568(金币+1):谢谢回帖！ 2010-04-11 16:39
成点性好的话，在柱子上跑的时候这个点也就基本会集中在一个比较窄的带，这样同一个样品就会集中在一起，如果成点性不好的话，在柱子上也会拖得很长，这样样品比较分散，效果就不好，同一个样品会在很多流分中出现。所以尽量选择成点性好的溶剂系统
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5楼2010-04-11 16:19:55
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小叶子5501

金虫 (小有名气)
谢谢各位的指点！感谢！
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6楼2010-04-11 21:45:06
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Cpuli87

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by xiaodu2007693 at 2010-04-10 21:23:45:
楼主需多试几个溶剂系统
乙酸乙酯层多用氯仿-甲醇，如果嫌毒性大可用二氯甲烷-甲醇代替
具体要用薄层板试，考查其成点性好不好
我们实验室是这样的，乙酸乙酯层基本有个通用的溶剂洗脱程序：
二氯甲烷-甲醇从 ...

那你们一般冲几个柱体积呢，还是不停的薄层检测，再换梯度什么的？疑问中，忘高手解答！
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7楼2010-04-17 15:53:32
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