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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小叶子5501

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于硅胶柱层层析的梯度洗脱问题 已有5人参与

硅胶柱层层析的梯度洗脱问题
本人现在做的天然产物的提取分离,粗体物先用乙酸乙酯萃取了,准备用硅胶柱大体分一下段,但是怎么确定分段时候所用流动相的梯度哪?我用石油醚和丙酮跑了薄层板,物质大致集中在中等极性部位,请各位有经验的赐教。谢谢各位
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-04-11 16:38
楼主需多试几个溶剂系统
乙酸乙酯层多用氯仿-甲醇,如果嫌毒性大可用二氯甲烷-甲醇代替
具体要用薄层板试,考查其成点性好不好
我们实验室是这样的,乙酸乙酯层基本有个通用的溶剂洗脱程序:
二氯甲烷-甲醇从(100:0)开始,然后是99:1,98:2......一直到90:10,这个过程相对跑的比较细,之后就可以用85:15,80:20,70:30,60:40,50:50,如果没啥东西了就用甲醇冲柱了。
以上仅供楼主参考。
欢迎您来药学版~
2楼2010-04-10 21:23:45
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白巧克力

铜虫 (小有名气)

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-04-11 16:38
既然是砍断,就不用太精细,我在砍断一般是用减压砍,以9:1氯仿/甲醇开始,逐渐10%降,既8:2,7:3......
仅供参考吧
停止堕落
3楼2010-04-10 21:45:38
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小叶子5501

金虫 (小有名气)

谢谢楼上各位的帮助,不过我有一点不是很明白,“具体要用薄层板试,考查其成点性好不好”的意思就是用什么洗脱剂要看呈点性好不好呗,就用呈点性好的展开剂作为洗脱剂被?是这个意思吗?
请各位指点谢谢!
4楼2010-04-11 13:07:10
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westzilch

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-04-11 16:39
成点性好的话,在柱子上跑的时候这个点也就基本会集中在一个比较窄的带,这样同一个样品就会集中在一起,如果成点性不好的话,在柱子上也会拖得很长,这样样品比较分散,效果就不好,同一个样品会在很多流分中出现。所以尽量选择成点性好的溶剂系统
5楼2010-04-11 16:19:55
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小叶子5501

金虫 (小有名气)

谢谢各位的指点!感谢!
6楼2010-04-11 21:45:06
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Cpuli87

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiaodu2007693 at 2010-04-10 21:23:45:
楼主需多试几个溶剂系统
乙酸乙酯层多用氯仿-甲醇,如果嫌毒性大可用二氯甲烷-甲醇代替
具体要用薄层板试,考查其成点性好不好
我们实验室是这样的,乙酸乙酯层基本有个通用的溶剂洗脱程序:
二氯甲烷-甲醇从 ...

那你们一般冲几个柱体积呢,还是不停的薄层检测,再换梯度什么的?疑问中,忘高手解答!
7楼2010-04-17 15:53:32
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