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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】帮忙分析一下这个梯度洗脱程序
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xinzaidongbei

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】帮忙分析一下这个梯度洗脱程序 已有9人参与

本人没有做过高效液相的梯度洗脱，文献中的内容看不懂，请高手不吝赐教
下表是外文文献中的一个高效液相梯度洗脱程序表
Time（min）          Buffer  (A)  %       Buffer(B) %     Gradient
0.1                            75                               25          Isocratic
7                               75                               25          Isocratic
15                             30                               70          Linear
8                               30                               70          Isocratic
10                               0                               100        Isocratic
3                               75                               25          Linear
存在的疑问：
1.前面的时间指的是啥意思？为啥不是中文文献中的0-7，8-10，11-15等这种按从
  小到大的顺序写的？
2.第四列中的梯度中的Isocratic（等梯度）和 Linear（线性梯度）代表的是啥意思？
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1楼 2010-04-10 13:25:24
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hel245

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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chiraler(金币+1):thanks! 2010-04-10 22:47
我的理解哈

7分钟走25%的等度，然后再15min内从25%---70%,然后70%等度8min，后面应该就是直接上100%高比例冲柱子了，然后平衡

等高手解释
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2楼2010-04-10 13:38:15
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xinzaidongbei

铜虫 (小有名气)
谢谢，等待高手指点迷津
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3楼2010-04-10 15:14:39
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foxling2

铜虫 (小有名气)
★ ★
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chiraler(金币+1):thanks! 2010-04-10 22:47
引用回帖:
Originally posted by xinzaidongbei at 2010-04-10 13:25:24:
本人没有做过高效液相的梯度洗脱，文献中的内容看不懂，请高手不吝赐教
下表是外文文献中的一个高效液相梯度洗脱程序表
Time（min）          Buffer  (A)  %       Buffer(B) %     Gradient
0.1             ...

看这个梯度，很明显文献作者使用的不是常规C18色谱柱，因为他用的两种流动相都是缓冲盐（buffer）。所以色谱柱应该是离子交换类色谱柱。文献的流动相配比是调整流动相的离子强度以改变流动相的洗脱能力，如果是这样，可能buffr（B）就是强离子溶液，增加B的浓度就等于反相色谱中增加有机相的浓度一样增强了洗脱能力。楼主可能没弄明白文献作者的方法到底是什么吧。
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yyh
4楼2010-04-10 19:31:31
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月光晒谷

铜虫 (小有名气)
等待高手
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5楼2010-04-10 20:04:30
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xiaomao2009

木虫 (小有名气)
★ ★
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opq691(金币+1):感谢参与交流，欢迎常来分析版 2010-04-13 15:29
开始的0.1min是表示色谱柱在进样前的平衡时间，平衡0.1min 后按下面的梯度进行。
等度就表示这段时间内液相是按相同的洗脱系统进行的，线性梯度表示这段时间内液相是随时间等梯度变化的
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有梦去追，希望相随～～
6楼2010-04-11 23:13:29
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xinzaidongbei

铜虫 (小有名气)
回3楼：
柱子是：S5 ODS2，应该是离子交换柱子
Buffer  (A)：醋酸钠缓冲液
Buffer  (B)：乙腈
存在的疑问：
  前面的时间指的是啥意思？为啥不是中文文献中的0-7，8-10，11-15等这种按从小到大的顺序写的？它具体代表的是怎样一个操作过程？
回5楼：
平衡0.1min后，走下面的程序，为啥到15以后又回到8了呀？不是按从小到大的时间顺序走下来的吗？
实在是不懂，请多多指教
  谢谢大家的参与
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7楼2010-04-12 17:29:15
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
★ ★ ★ ★ ★ ★
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佳怡(金币+5):厉害，学习了 2010-04-13 15:01
显然楼主没有明白老外的习惯！！
1.前边的时间是流动相变化或者保持该比例所用时间！即从上一个流动相比例变化到该比例所用时间！
2.第二个问题更简单了！当没有变化肯定是等度，有变化才是线性梯度！！
以上为例：
0.1                            75                               25          Isocratic
7                               75                               25          Isocratic
标示在前7分钟流动相比例为：A:B=75：25,
15                             30                               70          Linear
标示在8-22分钟时流动相从75：25变化到30：70
8                               30                               70          Isocratic
保持8分钟，到第30分钟
10                               0                               100        Isocratic
30--40分钟线性梯度变化从30：70到0：100
3                               75                               25          Linear
41--43分钟，从0：100梯度到75：25
中间时间可能有算得不准的，大体就是这么个意思！！

[ Last edited by happy169 on 2010-4-13 at 09:03 ]
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我为新生
8楼2010-04-13 09:01:39
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xinzaidongbei

铜虫 (小有名气)
明白了，谢谢
老外真笨，这么简单的问题，写这么麻烦，哈哈
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9楼2010-04-13 09:56:47
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by happy169 at 2010-04-13 09:01:39:
显然楼主没有明白老外的习惯！！
1.前边的时间是流动相变化或者保持该比例所用时间！即从上一个流动相比例变化到该比例所用时间！
2.第二个问题更简单了！当没有变化肯定是等度，有变化才是线性梯度！！
以上为 ...

顶，就是这个意思
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10楼2010-04-13 11:02:02
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