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rexue997

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】应跑电泳时该跑出两条带的 ,却跑出了三条带,为什么? 已有10人参与

最近做PCR,跑电泳,某些引物做完PCR之后,跑电泳,本来杂合的情况下应该跑出两条带,却跑出了三条带。但是纯合的情况下确实很正常的一条带,不明白这是为什么?
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way2009way6860

金虫 (正式写手)

是不是里面有杂质呢?
GO,GO,加油!
2楼2010-04-09 18:44:52
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shuwenying

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-10 12:08
你的意思是不是说:野生型的纯合子和突变的纯合子是只有一条带,杂合子除了有野生和突变两条带之外,还多了一条不明条带?
你做的是哪种类型的基因型鉴定?SNP?
觉得应该是有某些非特异扩增吧,一般来说,我自己的话,就直接换引物了~要是你想深入研究的话,切胶回收DNA再测序吧,看看多出来的是什么东西
3楼2010-04-09 20:16:15
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shuwenying

铁虫 (小有名气)

要不然你可以把电泳图和一些详细的位点情况,发短消息给我……
4楼2010-04-09 20:18:23
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

你具体做的是什么?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2010-04-09 20:25:10
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DNAhelix

银虫 (著名写手)

要么引物特异性不好,要么是该基因具有多个“拷贝”。
智慧活法:不生气,不计较!
6楼2010-04-09 20:52:24
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主还是说清楚做的什么标记,然后大家再帮你分析,如果该位点多对引物出现这种情况,还有可能存在三倍体
7楼2010-04-10 00:49:11
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rexue997

银虫 (小有名气)

做的是SSR标记,我做的是水稻,一定是二倍体,不可能是三倍体
8楼2010-04-10 09:28:11
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dy_414

木虫 (正式写手)

看照片再分析。。。
我坚信,rp是攒出来的
9楼2010-04-10 12:49:10
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
SSR标记有的时候会有这种情况,通常是假引物引起的,也就是说三条带中有一条带不含有微卫星序列,通常是可以看出来的,一般会有一条带的颜色浅或者深,如果不是这样,三条带完全一致,那么我觉得可能在这个位点有可能存在倍性问题,也不一定非得是三倍体,四倍体也可能跑出三条带,某个染色体部分加倍,在植物中也是存在这种现象的,具体了解的不是很细致,我是做动物的
10楼2010-04-10 19:38:31
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