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yoyo1919

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】有点担心那 已有5人参与

昨天消化了20瓶细胞,用无血清培养基重悬,折腾了一个上午。然后4℃冰盒装好乘车去另外一个地方给裸鼠接种,大约路程和实验准备上花了1个多小时。关键是,我养的lovo细胞一直都是粘成一团在长,很少的单个细胞。昨天在消化的时候,因为要涉及到计数做成规定浓度的细胞悬液,而不消化好根本就数不清楚,就会很多团块那种,每个团块2,3十个细胞紧密粘成一团。所以,我消化了40分钟(先加入足量胰酶,然后吸出绝大多数,只剩少部分消化,在37℃/5%CO2孵箱中进行的)。今天一想到这个问题就担心那,不知道这样消化会死多少细胞,在加上路上的时间,不知道能在裸鼠身上长起来吗。之前,我试过消化过夜(14小时),团块倒是散开很多,但是,细胞绝大部分都死了,只活下来了零星的细胞。不知道这次消化40分钟会有多少死的呢。
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愿众生离苦得乐,世界和谐温馨,我立誓诚受劝勉,从此珍惜,以清净之心,除陋弊,从良善,怀感恩,去我执
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pidou

木虫 (正式写手)

不知道,没做过,友情顶贴吧
2楼2010-04-07 22:52:44
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silicare

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yoyo1919(金币+1):谢谢建议,不过胶原酶一般不是做原代的时候用得多吗? 2010-04-08 20:10
同情啊,有些细胞就是爱抱团,换胶原酶试试吧
3楼2010-04-08 08:58:29
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yoyo1919

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-04-08 08:58:29:
同情啊,有些细胞就是爱抱团,换胶原酶试试吧

而且,胶原酶用几型的?
我印象中胶原酶是没有胰酶的消化能力强的
愿众生离苦得乐,世界和谐温馨,我立誓诚受劝勉,从此珍惜,以清净之心,除陋弊,从良善,怀感恩,去我执
4楼2010-04-08 20:11:35
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

★
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-09 12:40
所以是消化开,不是消化成碎片啊
5楼2010-04-09 08:05:26
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yufuxian

木虫 (著名写手)

★
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-09 12:39
yoyo1919(金币+1):谢谢交流 2010-04-09 20:57
没做过这种细胞的,不过我觉得消化40分钟的话,对于一般的细胞是没有问题的
6楼2010-04-09 09:07:53
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gaozx123

金虫 (小有名气)

★
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-09 12:39
yoyo1919(金币+1):谢谢交流 2010-04-09 20:57
阿门。
没养过这种细胞,但是这种程度的消化还是第一次听说,胰酶最适温度37°,消化10分钟应该就够长了吧,是不是考虑加点EDTA试试。
祝好运
7楼2010-04-09 09:26:13
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yoyo1919

铜虫 (正式写手)

报告,体内长出肿瘤来了。
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8楼2010-04-13 23:54:21
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