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wfyvuj

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【讨论】进样量和浓度的问题 已有8人参与

小女最近在做标曲,打算配成较低浓度进不同体积,正常进样量是10UL,标曲进到20UL前延得很厉害,于是把混标稀释2倍进20UL不前延,进40UL也不前延,可是我在样品(中药)有比原混标浓度高5倍的进10UL也不前延。如果说是超载,这个现象怎么解释呢?
请教高手,还有我想知道进样量,浓度的影响,进低浓度大体积跟进高浓度小体积有什么差别,为什么??比如我前面的原混标进20UL跟稀释2倍进40UL,理论上是一样的,可是一个有问题一个没有。
谢谢!!!!
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分析小木虫

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题我最近也很想学习下
2楼2010-04-07 15:09:09
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fanchem9895

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
进样量的不同是不是会影响到塔板数啊?只是我的猜测。。。
3楼2010-04-07 16:41:00
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上官长云

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复 2010-04-08 19:42
大体积进样,会因样品在洗脱过程中扩散造成峰展宽;高浓度进样则可能引起超载。总之峰形都不会好。
4楼2010-04-08 15:06:48
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adsszw

木虫 (正式写手)

来学习学习,马上也做标准曲线
5楼2010-04-08 16:21:29
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yyhx9540

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复 2010-04-08 19:43
色谱柱上固定液的量决定进样量,一般毛细管柱应在2微升,浓度的值一般为不出平头峰为限
6楼2010-04-08 17:36:38
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baeyer

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-04-09 13:38
1、大部分时间来说高浓度小体积进样产生的峰型会更好一些,柱外扩散小
2、过载会导致前伸峰,但标样溶剂和流动相体系不相容有时也会出现前伸,所以大家常用流动相定容

最好说明流动相体系,和操作过程,才好判断
7楼2010-04-08 22:17:11
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cdccd

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-04-09 13:38
要看什么色谱类型
要是凝胶色谱,当然是体积越小浓度越高峰型越好。看楼主的说法,应该是反相色谱吧?
反相色谱就根据样品分两种情况,一种是分配色谱,这样的话进样体积不能大。另一种是吸附色谱,吸附色谱浓度超载比体积超载的负面影响更大些。
忠厚啊!你正是无能的别名!
8楼2010-04-09 08:44:04
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wfyvuj

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by baeyer at 2010-04-08 22:17:11:
1、大部分时间来说高浓度小体积进样产生的峰型会更好一些,柱外扩散小
2、过载会导致前伸峰,但标样溶剂和流动相体系不相容有时也会出现前伸,所以大家常用流动相定容

最好说明流动相体系,和操作过程,才好判断

是哦,我的流动相是水和乙腈,标品当时想用甲醇能保存的久一点,用的甲醇,后来发现就是这个原因,谢谢!
9楼2010-04-10 18:04:10
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