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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【讨论】进样量和浓度的问题
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wfyvuj

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【讨论】进样量和浓度的问题 已有8人参与

小女最近在做标曲，打算配成较低浓度进不同体积，正常进样量是10UL，标曲进到20UL前延得很厉害，于是把混标稀释2倍进20UL不前延，进40UL也不前延，可是我在样品（中药）有比原混标浓度高5倍的进10UL也不前延。如果说是超载，这个现象怎么解释呢？
请教高手，还有我想知道进样量，浓度的影响，进低浓度大体积跟进高浓度小体积有什么差别，为什么？？比如我前面的原混标进20UL跟稀释2倍进40UL，理论上是一样的，可是一个有问题一个没有。
谢谢！！！！
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1楼 2010-04-07 13:30:57
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分析小木虫

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我最近也很想学习下
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2楼2010-04-07 15:09:09
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fanchem9895

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
进样量的不同是不是会影响到塔板数啊？只是我的猜测。。。
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3楼2010-04-07 16:41:00
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上官长云

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复 2010-04-08 19:42
大体积进样，会因样品在洗脱过程中扩散造成峰展宽；高浓度进样则可能引起超载。总之峰形都不会好。
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4楼2010-04-08 15:06:48
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adsszw

木虫 (正式写手)
来学习学习，马上也做标准曲线
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5楼2010-04-08 16:21:29
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yyhx9540

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复 2010-04-08 19:43
色谱柱上固定液的量决定进样量，一般毛细管柱应在2微升，浓度的值一般为不出平头峰为限
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6楼2010-04-08 17:36:38
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baeyer

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-04-09 13:38
1、大部分时间来说高浓度小体积进样产生的峰型会更好一些，柱外扩散小
2、过载会导致前伸峰，但标样溶剂和流动相体系不相容有时也会出现前伸，所以大家常用流动相定容

最好说明流动相体系，和操作过程，才好判断
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7楼2010-04-08 22:17:11
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cdccd

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-04-09 13:38
要看什么色谱类型
要是凝胶色谱，当然是体积越小浓度越高峰型越好。看楼主的说法，应该是反相色谱吧？
反相色谱就根据样品分两种情况，一种是分配色谱，这样的话进样体积不能大。另一种是吸附色谱，吸附色谱浓度超载比体积超载的负面影响更大些。
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忠厚啊！你正是无能的别名！
8楼2010-04-09 08:44:04
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wfyvuj

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by baeyer at 2010-04-08 22:17:11:
1、大部分时间来说高浓度小体积进样产生的峰型会更好一些，柱外扩散小
2、过载会导致前伸峰，但标样溶剂和流动相体系不相容有时也会出现前伸，所以大家常用流动相定容

最好说明流动相体系，和操作过程，才好判断

是哦，我的流动相是水和乙腈，标品当时想用甲醇能保存的久一点，用的甲醇，后来发现就是这个原因，谢谢！
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9楼2010-04-10 18:04:10
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