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xiongzai08

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于葡萄糖标准曲线的制备

我最近在用做葡萄糖的标准曲线,已经做了三遍了,硬是没做出来,我的方法是:配好0.5mg/ml的葡萄糖标准溶液,分别取20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl于10ml的容量瓶中,加入5%苯酚溶液1ml,混匀,迅速加浓硫酸7ml,摇匀,定容,置于40度的水浴中保温30分钟,去除后置于冰水浴中5分钟。经过紫外扫描后,发现对照品中前三个的吸收值是负值,我是用了空白建立基线的,不知道为什么。还有就是所有对照品加浓硫酸时会很烫,不知道对检查有没有影响,当加完硫酸后用水定容时溶液的颜色都会从绿色变为黑色,发热同样很严重,我个人认为这个地方出了问题,请各位做了葡萄糖标准曲线的高手给个合理的解释,小弟感激不尽。
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