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【求助/交流】免疫研究的动物实验方法 已有1人参与
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动物免疫血清的制备方法 试验准备（一）动物的选择 用于制造免疫血清的动物，首先要求健康、体壮，对免疫原刺激反应性好。其次是血清采集方便，收获量大。还要考虑操作方便，易于得到。常用的动物有兔、山羊、绵羊、鸡、豚鼠等。 具体选择时，应考虑尽可能使用SPF动物、清洁动物，并且是非免疫动物。大动物要求未发生过传染病。 动物的年龄，要求青壮年。大量生产免疫血清一般多选用马、牛进行。 抗原处理 抗原是一类能刺激机体产生抗体，且能与抗体发生特异性结合反应的物质。大多数蛋白质如细菌、病毒及其代谢产物（毒素等）和异种血清等具有良好的免疫原性，是完全抗原。而绝大多数多糖、类脂和一些分子量小的蛋白质、多肽及一些化学物质，因缺乏免疫原性称之为不完全抗原或半抗原。对于半抗原必须进行适当处理。1、载体的选择：载体是指与半抗原结合后，能促使半抗原具备免疫原性的大分子物质，如血清蛋白、球蛋白等。最常用的是血清白蛋白。2、连结方法：采用化学的方法，使半抗原结合到载体上，并成为载体蛋白的功能团，即抗原决定簇。连结时：不应造成半抗原的结构变化，也不能使蛋白载体变性。 (三）佐剂的种类与制备佐剂：是指能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答的一类物质。1、佐剂的标准：（1）应无致癌作用及辅助致癌作用，不能诱导和促进肿瘤形成。（2）应无毒性。（3）应具有一定的吸附能力。（4）具有极高的纯度。（5）应能为动物降解吸收，不宜长期留在体内或诱发组织损伤。（6）不含有与动物有交叉反应的抗原物质。（7）不应诱发自身超敏性，也不应与免疫抗体形成有害的免疫复合物。（8）应性质稳定，能长期贮存。 2、佐剂的种类：（1）油乳佐剂：佛氏佐剂、白油佐剂等。（2）胶体佐剂：氢氧化铝胶、明矾佐剂。（3）合成佐剂：溴化十八烷基三甲基铵（4）微生物佐剂：结核分枝杆菌、葡萄球菌、百日咳杆菌等。（5）动物源佐剂：蜂胶等。（6）植物源佐剂：某些中草药、植物的提取物等。（7）核酸及其类似物：DNA、RNA、多核苷酸等。3、常用佐剂的制备： |
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1949stone(金币+1): 2010-04-04 13:32
1949stone(金币+1): 2010-04-04 13:32
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免疫程序与效价测定 （一）免疫程序 制取不同抗原的免疫血清所采用的免疫程序不同，但基本遵循这样的原则：基础免疫￫增强免疫￫检查抗体滴度￫采集 1、免疫途径：基础免疫，一般选择皮内、皮下注射或肌肉注射。抗原来源困难的，选择皮内多点注射。加强免疫多选用皮下、肌肉或静脉注射。 2、佐剂选择：抗原免疫原性差的多选择油乳佐剂及免疫增强剂等，抗原免疫原性较好的选择一般佐剂。基础免疫时加佐剂，而加强免疫时不加佐剂。 3、抗原的选择：基础免疫多选用灭活或弱毒抗原，抗体产生后，可用强毒或加大攻击量。 三、免疫血清的采集与提纯 （一）免疫血清的采集抗体效价合格后，即可收集动物血清。可以一次性放血，也可多次采集。1、采血方法2、免疫血清的收集 （二）免疫球蛋白的分离与提纯 盐析→脱盐→提纯 |
2楼2010-04-04 12:36:33
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1949stone(金币+1): 2010-04-04 13:32
1949stone(金币+1): 2010-04-04 13:32
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肿瘤组织移入动物体内的方法 人体肿瘤组织移植入动物体内的方法动物：免疫缺陷动物。裸小鼠、裸大鼠等。移植方法：1、肿瘤组织块移植2、肿瘤组织悬浮液移植3、肿瘤组织培养液移植移植途径：1、皮下移植2、肾包膜移植3、原位移植 二、动物间肿瘤组织的移植方法 动物间肿瘤组织移植术可分为两类：免疫缺陷动物间肿瘤移植和非免疫缺陷动物间肿瘤移植。 免疫缺陷动物间肿瘤移植：将已在裸鼠体内成功生长的肿瘤以组织块或细胞方式，继续移植到其他裸鼠的体内进行传代。 非免疫缺陷动物间肿瘤移植：将在正常动物体内生长的肿瘤，以组织块或细胞方式进行传代给正常动物。一般来说，该肿瘤组织来源于该品系动物本身，而且局限于在该品系动物间相互移植传代才能成功，在异种动物体内则不能生长。 |
3楼2010-04-04 12:37:26