应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RT-PCR结果分析
162/2返回列表上一页12
查看: 1106  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pidou 的 1 个金币

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou at 2010-04-05 00:41:20:
我的引物是别人用过的了，是简并行引物，这个我觉得应该不会有什么影响吧？？


如果是简并引物，你应该根据简并度，适当增加引物用量，照你现在的说法，我觉得增加了引物用量，你的扩增应该会强一些，但是明显看到好像还有引物二聚体，所以也很难说，试试吧，降低退火温度也试试

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-6 at 17:42 ]
赞一下 回复此楼
11楼2010-04-06 17:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sn198651

银虫 (初入文坛)
pidou(金币+1):请问一下，阴阳对照怎么做？能否再麻烦一下，谢谢 2010-04-06 21:11
按照我们这边的话 这个算是失败的
一般你做个阴阳性对照 一起来做
如果你的阳性对照要是很亮的话就不是引物问题 而是样品的问题
如果阳性对照依然不清晰的话最好换个引物看看把
赞一下 回复此楼
12楼2010-04-06 18:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DNAhelix

银虫 (著名写手)
pidou(金币+1):谢谢你的回复，但是假如我的cDNA质量是不变的，请问如何才能增加PCR的产量？或者说cDNA的质量影响有多大？ 2010-04-06 17:12

回复楼主：
增加循环数，增加cDNA模板的体积。

至于cDNA的质量影响有多大，看降解程度及RNA的纯度而定吧。
赞一下 回复此楼
智慧活法：不生气，不计较！
13楼2010-04-06 18:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sn198651

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-09 12:37
可以这样说你找个已知同类型的阳性样品做阳性对照
用dd水或DEPC水做为阴性对照
和你的样品一起做RT-PCR
当然最好还是用带滤芯的枪头更好些

不知道你的RT-PCR的样品是一次提多少的
我这边一般阴性阳性和样品每个都用200微升
很少出现这么弱的
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2010-04-09 08:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou

木虫 (正式写手)
200ul?????



这么多啊？？
带滤芯的枪头？？为什么呢？
引用回帖:
Originally posted by sn198651 at 2010-04-09 08:21:55:
可以这样说你找个已知同类型的阳性样品做阳性对照
用dd水或DEPC水做为阴性对照
和你的样品一起做RT-PCR
当然最好还是用带滤芯的枪头更好些

不知道你的RT-PCR的样品是一次提多少的
我这边一般阴性阳性和样品 ...

赞一下 回复此楼
15楼2010-04-11 00:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioplant

木虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-11 10:38
兼并引物扩增出多条片段是常见的，可以设计巢式引物，以第一次PCR的产物为模板扩增，往往得到一条带啦。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-04-11 08:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pidou 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭