应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RT-PCR结果分析
162/2返回列表上一页12
查看: 918  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pidou 的 1 个金币

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou at 2010-04-05 00:41:20:
我的引物是别人用过的了，是简并行引物，这个我觉得应该不会有什么影响吧？？


如果是简并引物，你应该根据简并度，适当增加引物用量，照你现在的说法，我觉得增加了引物用量，你的扩增应该会强一些，但是明显看到好像还有引物二聚体，所以也很难说，试试吧，降低退火温度也试试

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-6 at 17:42 ]
赞一下 回复此楼
11楼2010-04-06 17:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sn198651

银虫 (初入文坛)
pidou(金币+1):请问一下，阴阳对照怎么做？能否再麻烦一下，谢谢 2010-04-06 21:11
按照我们这边的话 这个算是失败的
一般你做个阴阳性对照 一起来做
如果你的阳性对照要是很亮的话就不是引物问题 而是样品的问题
如果阳性对照依然不清晰的话最好换个引物看看把
赞一下 回复此楼
12楼2010-04-06 18:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DNAhelix

银虫 (著名写手)
pidou(金币+1):谢谢你的回复，但是假如我的cDNA质量是不变的，请问如何才能增加PCR的产量？或者说cDNA的质量影响有多大？ 2010-04-06 17:12

回复楼主：
增加循环数，增加cDNA模板的体积。

至于cDNA的质量影响有多大，看降解程度及RNA的纯度而定吧。
赞一下 回复此楼
智慧活法：不生气，不计较！
13楼2010-04-06 18:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sn198651

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-09 12:37
可以这样说你找个已知同类型的阳性样品做阳性对照
用dd水或DEPC水做为阴性对照
和你的样品一起做RT-PCR
当然最好还是用带滤芯的枪头更好些

不知道你的RT-PCR的样品是一次提多少的
我这边一般阴性阳性和样品每个都用200微升
很少出现这么弱的
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2010-04-09 08:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou

木虫 (正式写手)
200ul?????



这么多啊？？
带滤芯的枪头？？为什么呢？
引用回帖:
Originally posted by sn198651 at 2010-04-09 08:21:55:
可以这样说你找个已知同类型的阳性样品做阳性对照
用dd水或DEPC水做为阴性对照
和你的样品一起做RT-PCR
当然最好还是用带滤芯的枪头更好些

不知道你的RT-PCR的样品是一次提多少的
我这边一般阴性阳性和样品 ...

赞一下 回复此楼
15楼2010-04-11 00:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioplant

木虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-11 10:38
兼并引物扩增出多条片段是常见的，可以设计巢式引物，以第一次PCR的产物为模板扩增，往往得到一条带啦。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-04-11 08:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pidou 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +6 asdasdassda 2026-04-05 7/350 2026-04-12 00:26 by 丛麟ll
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 296求调剂 +13 汪！？！ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 10:31 by 逆水乘风
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +30 @ASDF1234 2026-04-08 32/1600 2026-04-11 10:30 by Delta2012
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 求调剂，现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
[考研] 336求调剂，一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 调剂求助（生物与医药） +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 071000生物学，一志愿深圳大学296分，求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考博] 博士申请 +3 IQwQl 2026-04-05 3/150 2026-04-07 20:31 by greychen00
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 一志愿青科085500，初试295分，公共课213分 +3 遇到的人愿望都� 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:45 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭