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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白标签是否影响蛋白功能？
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 jason_hulan 的 2 个金币

jason_hulan

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】蛋白标签是否影响蛋白功能？

如题，请教各位虫子：1，蛋白标签是否影响蛋白功能？免疫学或构象之类。
2，是否有相关文献讨论讨论到这些问题？如果有，请告知。
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Keeping looking
1楼 2010-04-02 10:04:35
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★
1949stone(金币+1): 2010-04-02 10:50
一般小标签没太大影响，也看你的蛋白要做什么实验。这要拿实验数据说话，最好做个比较。
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2楼2010-04-02 10:33:18
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骚人追月

金虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1): 2010-04-02 10:50
jason_hulan(金币+3): 2010-04-02 11:42
An alternative tandem affinity purification strategy applied to
Arabidopsis protein complex isolation


有的影响，有的不影响，这篇文章就是个例子
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会做饭就会做实验？
3楼2010-04-02 10:38:43
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
1949stone(金币+1): 2010-04-02 10:50
of course ！

不过一般的重组蛋白也都没办法

，有时会用肠激酶等切掉标签，但效果也不见得强多少，比较你的标签切不完全，只要一个AA有变化都会影响结构，进而影响功能

所以蛋白重组这事很大程度上也靠运气
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4楼2010-04-02 10:44:49
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jason_hulan

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 骚人追月 at 2010-04-02 10:38:43:
An alternative tandem affinity purification strategy applied to
Arabidopsis protein complex isolation


有的影响，有的不影响，这篇文章就是个例子

谢谢你的回复，正是我想要了解的。请问，还有类似相关的文章吗？
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Keeping looking
5楼2010-04-02 11:43:17
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dy_414

木虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):谢谢交流！:tiger23: 2010-04-02 14:45
传统的一些应该不会，比如his，GST
但是如果涉及生产，就不好说了，至少要有毒性的对照。
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我坚信，rp是攒出来的
6楼2010-04-02 12:36:47
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骚人追月

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-04-02 10:44:49:
of course ！

不过一般的重组蛋白也都没办法

，有时会用肠激酶等切掉标签，但效果也不见得强多少，比较你的标签切不完全，只要一个AA有变化都会影响结构，进而影响功能

所以蛋白重组这事很大程度上也靠运气

我只是做TAP的，所以就这么一篇相关文章，关于其他的标签就不知道了
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会做饭就会做实验？
7楼2010-04-03 08:44:18
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★
scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger23: 2010-04-03 10:24
Overview of tag protein fusions from molecular and biochemical fundamentals to commercial systems
Current strategies for the use of affinity tags and tag removal for the purification of recombinant proteins
Comparison of affinity tags for protein puriffication
这几篇文献可能对你有点用。

就我做过的来看，只有His-tag对功能没有显著影响，其他的标签都要切掉，不然对功能影响很大，因为其标签有点大，不管时免疫原性还是对空间构象的影响都比较大。道理比较简单，公交车上，你旁边坐个大胖子和坐个小孩，你的姿态肯定会不一样，如果大胖子还有点体味的话，就更不一样了。
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生物资源交流QQ群：1044518333
8楼2010-04-03 10:10:04
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
不错，真的挺好的
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I am not a hero , but I served with heroes！
9楼2010-04-03 13:30:44
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★
scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger06: 2010-04-03 14:46
一般来说His标签可以保留，不会对蛋白的结构和功能有很大影响，但是这不绝对，有时候需要你切掉。但是GST标签就不一样了，26KD，是个非常大的蛋白，需要切掉。
你可以根据你的实验而定，在标签和你的蛋白之间加入蛋白酶切点，比如Xa 凝血酶 或者PP 。都很常用，酶也很容易买到，有影响了切掉，没影响保留。
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10楼2010-04-03 13:49:41
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