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cornell123

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】组织中提取的RNA与血清中提取的有什么差别

组织中提取的RNA与血清中提取的有什么差别吗,扩增的时候会有什么样的差异吗
为什么组织中提取的RNA进行PCR扩增后会有杂带呢,血清中和细胞上清中扩增的没有杂带

比较亮的是血清中扩增的目的条带
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
cornell123(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-01 12:51
RNA在不同组织中是有差异的,不同组织具有不同的功能,自然会表达不同的mRNA,这很正常,你的PCR跑成这样也很正常
2楼2010-04-01 10:51:27
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won7

金虫 (小有名气)

★ ★
cornell123(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-04-01 12:51
你组织中提取的RNA可能有DNA污染,所以会有比目的带大的带(可能是含内含子的DNA),建议用DNase I消化后再反转录,应该会好一些。
3楼2010-04-01 10:57:31
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cornell123

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-01 10:51:27:
RNA在不同组织中是有差异的,不同组织具有不同的功能,自然会表达不同的mRNA,这很正常,你的PCR跑成这样也很正常

那会不会跑出来的条带比目的片段稍微大一些呢,比方说大50到100bp
4楼2010-04-01 11:22:19
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shenyangph

木虫 (著名写手)


cornell123(金币+2):谢谢参与
外行人
帮顶
5楼2010-04-02 22:37:12
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angel2536

金虫 (著名写手)

★ ★
cornell123(金币+2):谢谢参与
scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06::tiger23: 2010-04-03 09:42
引用回帖:
Originally posted by won7 at 2010-04-01 10:57:31:
你组织中提取的RNA可能有DNA污染,所以会有比目的带大的带(可能是含内含子的DNA),建议用DNase I消化后再反转录,应该会好一些。

同意他说的,很可能有DNA污染,而你所扩增的片段的引物在DNA中有夸内含子。
6楼2010-04-03 08:24:24
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