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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】构建的大肠加入IPTG后不长
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xiangao

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】构建的大肠加入IPTG后不长

在大肠里表达纤维素酶，37度OD达到0.4后，加入诱导剂IPTG (0.5mM)30度诱导过夜，结果菌体OD没增加（对照菌OD长到1.5了），这是怎么回事啊？？而且没加诱导剂之前菌长的很正常啊
难道是表达的外源蛋白对菌有毒害作用？？不应该吧！
菌体跑SDS-PAGE没有发现过量表达的带啊   
请教这是怎么回事啊？？ 高人帮忙分析下啊 急
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1楼 2010-03-31 21:51:04
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
xiangao(金币+1):谢谢参与 2010-03-31 21:54
OD达到0.4加IPTG有点早了吧。至少也的0.8左右撒。
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2楼2010-03-31 21:53:25
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xiangao

金虫 (正式写手)
不是0.4~0.6 之间就可以吗
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3楼2010-03-31 21:54:26
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
xiangao(金币+1): 2010-03-31 22:11
试试自诱导吧，pET系统发明人studier发明的培养基培养，彻底解决了表达的蛋白有毒性的问题。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
4楼2010-03-31 21:58:43
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xiangao

金虫 (正式写手)
继续求助解决方法
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5楼2010-03-31 23:01:16
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