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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】E.coli 电转化
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caike6326

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】E.coli 电转化 已有5人参与

请教一下，E.coli 电转化的条件是什么，我用2500KV,25uF,200欧姆，2mm电转化杯，好像效率很低啊。是不是和电转化仪的牌子有关系，不同的厂家的，条件不一样啊。
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1楼 2010-03-30 08:54:26
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
1949stone(金币+1): 2010-03-30 12:36
和细菌的种类已经感受态的效率有直接关系，通常都需要按照文献来，不过这个感受态制备起来比化学感受态还简单，

所以还是要看文献的
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2楼2010-03-30 08:56:35
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caike6326

铁虫 (初入文坛)
我用的是BL21（DE3）,大家有用过的吗？
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3楼2010-03-30 09:35:22
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沙中清泉

木虫 (正式写手)
电转条件可能需要优化，制备感受态的方法也需要查阅文献
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4楼2010-03-30 09:45:10
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rosalie161

金虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 23:41
Bio-Rad X cell电击转化仪（在 2 . 5 kV / cm, 50μF,720Ω,约 22 . 6 ms条件下放电 ）


我的是这样的!
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Rosalei.....
5楼2010-03-30 14:27:07
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erosionsdd

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 23:42
本帖内容被屏蔽
6楼2010-04-08 21:30:28
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 23:42
细菌状态很重要。看一下分子克隆，摇菌过程中测定一下OD值
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7楼2010-04-08 21:55:58
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lidanye

金虫 (小有名气)
caike6326(金币+1): 2010-04-14 06:39
听说电转化过程中特别影响转化率的一个小步骤是
在加pulse后应该立即加上培养基，不然的话转化率会急剧下降
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8楼2010-04-13 17:53:29
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zrm1983

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是电转化的感受态有问题啊，电转化对盐浓度要求较高，盐浓度大，一般转不出来，你的东西最好是用双蒸水洗，而不是洗脱缓冲液洗，样品2-3微升就可以了
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9楼2010-04-17 11:18:27
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zrm1983

银虫 (小有名气)
是不是电转化的感受态有问题啊，电转化对盐浓度要求较高，盐浓度大，一般转不出来，你的东西最好是用双蒸水洗，而不是洗脱缓冲液洗，样品2-3微升就可以了
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10楼2010-04-17 11:18:46
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