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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于革兰氏阳性菌的菌落pcr方法
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huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于革兰氏阳性菌的菌落pcr方法

最近在做基因敲除实验 想用菌落pcr做鉴定 用的是谷氨酸棒杆菌 是革兰氏阳性菌 我用的方法是取2ul菌液95度预处理10min 然后其他的和普通的pcr一样 但是检测效果不好 请各位大侠多多指导
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1楼 2010-03-29 15:04:59
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tangw_007

银虫 (小有名气)
huangdi07(金币+1): 2010-03-30 09:04
你可以直接挑单菌落，一定不要挑多了，最好用接菌针稍稍点一下就行，你试试。其他不变。
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2楼2010-03-29 16:27:39
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
阳性不好破壁，可以多煮沸一会儿～
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3楼2010-03-30 21:47:35
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
可以先用溶菌酶处理一下，然后再煮一下或者pcr预变性时间可以延长到8-10分钟
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2010-03-31 13:41:29
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