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xiaoye0927木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】压力室 已有1人参与
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请问有谁用过压力室?什么牌子?什么型号的? 可以交流一下吗?谢谢 PS, 我需要对根部加压,这里介绍的压力室,是离体取样的,不是我需要的。。。 请问还有别的么?对整株加压的,麻烦l了 [ Last edited by xiaoye0927 on 2010-4-4 at 20:42 ] |
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三个小石子(金币+3):感谢热心应助! 2010-03-31 09:41
三个小石子(金币+3):感谢热心应助! 2010-03-31 09:41
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多年以前写了一个压力室应用说明: 压力室法测定水势的注意事项 by Z.W. Dai 按:用压力室已经很有“经验”了,其实现在想想用“经历”更合适。大学的实验课上学到如何应用,后来研究生阶段论文是关于水分胁迫的,压力室用了很久。直到最近再次做水分胁迫的实验时,一位老师目睹了我的测量过程,然后委婉的提出一点建议。当时我并没有放在心上,觉得有点小题大作。后来便读到了这篇综述 (Turner, 1988,Irrigation Science),我开始脸红起来。今天上午在网上查了一下相关的实验指导,以及仪器应用介绍,无疑很多注意事项并没有被广泛的提及(限于我所看到的资料而言)。所以,将一些要点摘录下来,一来备忘,同时说说自己的想法。 压力室法的工作原理: 记得我上试验课的时候对这一部分总是心怀畏惧,老师多讲一点便有些抱怨,‘我又不是开发仪器的,只要告诉我这个仪器能够测定什么,怎么测定就完了,简单明了!’。现在想想这种想法是自己思考惰性在发挥作用。现在教科书或实验指导中压力室法的工作原理大多数情况下只有简单的文字描述,但是须知每一种仪器工作时都有它的理论前提,如果应用这个方法的前提不成立了,还继续应用它,无疑会产生误导的结论。 压力室法测定得到的值实际上是质外体的基质势(the matric potential of the apoplast), 它与总水势(total water potential)相等或相似的前提是 1)质外体与相邻共质体之间的液体交流阻力很小,它们之间可以迅速达到平衡;2)质外体渗透势接近于0 。对于1)基本上在大多数植物中是成立的;而第二个前提条件便并非总是成立,特别是在一些果实(葡萄,草莓等)以及特殊植物的叶片中,质外体溶液浓度可以达到700mM, 其渗透势远远与零偏离。如果此时仍然采用压力室法,无疑会产生诸多误导结果。关于质外体溶质含量的问题已经引起很多植物生理学家的注意,但是目前还没有明确的理论表述(搜索apoplastic solute可以看到相关进展)。因此在果实水势测定过程中,方法的选择便有些让人头疼。最好的选择当然是压力探针,但是那个仪器昂贵,难于操作,限制了它的广泛应用;其它的热电偶法,也因为受温度影响较大,平衡时间长而需要特别小心。 好了言归正传,压力室法操作过程中需要注意的一些地方: 1)尽量减少取样与测量过程中被测量样品的蒸腾失水,尤其是在植物蒸腾速率很大的情况下(如中午水势测定)。取样后即使少量的水分散失也会导致大幅度的水势下降。看看这些数字就明白了:Turner 和Long的研究表明,对于蒸腾速率很高的叶片,在取样后最初20s内的水分散失可以导致水势降低0.7MPa。(太恐怖了吧,这个变化足以把处理效果掩盖!)。为减少从取样到测定过程中的水分散失,测定样品从植株上切离之前需先用塑料袋包裹。(这就是那位老师给我的建议,目前我测定的是葡萄叶片水势)。据美国一位拥有至少5000片葡萄叶片水势测定经验的教授Mark Greenspan介绍,葡萄叶片切离前包裹与不包裹可以导致0.2-0.3MPa 的水势差别(http://www.microirrigationforum.com/new/archives/glwpg.html)。所以我现在测定的时候便首先将叶片用塑料袋套住,然后切离测定。 2)测定叶片表面不要有水珠,因为他们可以提高水势0.1 –0.2 MPa。 3)样品不要二次切割,因为二次切割能够导致误差,其原因尚不清楚。坦白讲我之前用压力室的时候每次都是二次切割的!甚至在某些仪器应用的说明书上也标明如果切口不平滑,需要重新切割。可见这个建议值得考虑。但是我知道如何在第一次切割的时候做到平滑还需要些技巧和练习。我现在用的是医用手术刀,非常锋利,可以一次到位。 4)测量样品要尽量少的露出压力室,能清楚观察切面即可。如果外露太多,从压力室内样品挤压出的水分被用来填充压力室外样品中的自由空间,导致测量误差。 5)加压要缓慢,以每秒0.025 MPa为宜。加压初期可以稍快,但是近平衡点的时候一定要缓慢。这点倒是在大多数实验指导中均已经指出,可惜我没有看到数量性的描述。如果只有“缓慢”加压的描述,是很难准确理解其含义的,因为不知道什么是缓慢,不知道如何定义迅速。而这种笼统地介绍大概源于大多数压力室的简易,控制压力并非易事,所以只好跟着感觉做了。现在用的这个压力室有一个压力感器,通过数字显示屏显示压力,而且压力控制阀依次有4个之多,可以比较容易的控制加压速度。 6)平衡点的确认。这个每个用过压力室的都知道,不再多说。 至于应用过程中的安全注意事项,大多数介绍中均已经涉及,也不多说。 文字均编译自Turner, N. C. (1988). "Measurement of plant water status by the pressure chamber technique." Irrigation Science 9: 289-308. 需要全文者可留下邮箱。欢迎意见和讨论,希望一起提高。 (转载请注明出处,多谢) |

5楼2010-03-31 04:41:18
点点风
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