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wsshforget

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】当遇到需要T4 DNA聚合酶同时既需要补平又需要切除粘性末端怎么办?

酶切了一个片段,需要T4 DNA聚合酶进行处理,片段5‘端突起,3’端突起,想用T4 DNA聚合酶对5‘端补平,3’端突起切除,最终结果是两端是平末端。
但是T4 DNA聚合酶是加入dNTP后为聚合反应,不加的时候为酶切反应,我那个样子应该怎么加入dNTP?有没有人能具体讲述一下T4 DNA聚合酶的各种情况下的工作情况?
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song333

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-28 14:31
2楼2010-03-28 13:45:36
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-28 14:31
我做过一个质粒双酶切后用KLENOW大片段补平,然后用T4酶连接,效率很高
3楼2010-03-28 14:30:43
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