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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】液体培养大肠杆菌
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purplerain2586

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】液体培养大肠杆菌

想请教 液体培养大肠杆菌，有时候要加10mM  mgSo4 ，硫酸镁在培养菌的过程中起什么做用？谢谢！
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1楼 2010-03-28 10:48:27
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-28 16:25
我们一般在转染质粒，活化细胞的时候使用SOC培养基，SOC中添加氯化镁和硫酸镁，使用SOC比LB的活化效果好很多，活化步骤是关键目的是帮助细胞表达抗性基因，防止涂板时细胞抗性来不及表达，大量死亡，所以镁离子的加入估计就是使大肠杆菌的各种酶活力更旺盛
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2楼2010-03-28 16:20:29
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
楼上说的是质粒的转化过程中镁离子的作用~
但是楼主不知道是不是要进行此操作~
楼主还是要说明你用液体培养大肠杆菌是为了做什么？
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-03-28 18:56:35
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purplerain2586

金虫 (小有名气)
我是用来构建基因文库的！呵呵，谢谢！
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4楼2010-03-31 15:09:49
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快乐由自己go

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
基本同意2L说法。
LZ构建文库时用加了硫酸镁的培养基做转化实验还是保存重组克隆呢？
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5楼2010-04-01 13:54:28
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purplerain2586

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 快乐由自己go at 2010-04-01 13:54:28:
基本同意2L说法。
LZ构建文库时用加了硫酸镁的培养基做转化实验还是保存重组克隆呢？

是做转化实验的。它们有什么不同吗？
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6楼2010-04-01 15:54:11
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快乐由自己go

银虫 (小有名气)
★ ★
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scelab(金币+1):谢谢交流 2010-04-02 11:49
转化实验后的菌的复苏所用的培养基要求营养更丰富，加入硫酸镁应该是保证菌内酶活性，利于抗性表达。
保存克隆的培养基就要求一般了，普通的培养基，如LB就OK。
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7楼2010-04-02 11:47:43
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faith1

铁虫 (小有名气)
一个是保持酶的活性，不知道是不是还有一个原因——与大肠杆菌本身的生长有关系？
希望懂得的人可以不吝赐教哈～～
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8楼2010-04-02 21:59:28
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