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姜大磊

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】回收酶切小片段DNA和无引物PCR操作

酶切后的小片段大小不等,跑电泳时弥散火箭尾形状(符合要求),我需要回收大约20-500bp的,请问用什么方法回收呢?
有人做过无引物PCR的嘛,请问什么操作体系呢?谢谢
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j2

木虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-03-27 11:47
有专门回收小片段的试剂盒,你可以试试
修炼ing,当虫仙……
2楼2010-03-27 10:35:11
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fxy0570

金虫 (正式写手)

回收大约20-500bp的,是用酚氯彷,回收效率也高,我试过好多家公司的都不好,还有就是有专门回收小片段的试剂盒后来我没有用。
3楼2010-03-27 20:21:21
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姜大磊

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by fxy0570 at 2010-03-27 20:21:21:
回收大约20-500bp的,是用酚氯彷,回收效率也高,我试过好多家公司的都不好,还有就是有专门回收小片段的试剂盒后来我没有用。

那您后来是用什么方法回收小片段DNA的呢?请指教,谢谢!
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
4楼2010-03-27 21:13:34
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fxy0570

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 姜大磊 at 2010-03-27 21:13:34:

那您后来是用什么方法回收小片段DNA的呢?请指教,谢谢!

酚氯彷抽提的,相比其它的就是时间有点长!
5楼2010-03-28 19:03:33
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csjiang1123

木虫 (小有名气)

在DR-11-buffer后加五分之一的异丙醇,有点帮助。
6楼2010-03-28 22:11:24
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姜大磊

木虫 (小有名气)

谢谢 楼上朋友指点。但是没有根本的解决我的难处。 有做无引物PCR(有性PCR)的吗?能不能指教一下啊。
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
7楼2010-03-29 16:31:23
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