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liuyuxue铁杆木虫 (小有名气)
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质粒DNA提取溶液1、2、3的作用？
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| 如题，质粒提取溶液1、2、3的作用分别是什么？请高人指教。 |
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fandyu
金虫 (正式写手)
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希望对你有作用
liuyuxue(金币+2): 2010-03-27 11:03
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溶液1 50mM 葡萄糖 / 10mM EDTA / 25mM Tris-HCl，pH=8.0 葡萄糖增稠，使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部；EDTA 抑制DNase的活性。这一步溶液中还可以加入RNase，不受EDTA影响，并且可以在后续步骤中被除去。 溶液2 0.2M NaOH / 1% SDS 破细胞的主要是碱，而不是SDS，所以才叫碱法抽提。 溶液3 3M 醋酸钾 / 2M 醋酸 这一步的K置换了SDS（十二烷基磺酸钠）中的Na，得到PDS（十二烷基磺酸钾）沉淀；SDS易与蛋白质结合，平均两个氨基酸上结合一个SDS分子，钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质也沉淀了，同时基因组DNA也被PDS共沉淀 |
3楼2010-03-27 10:40:16
j2
木虫 (正式写手)
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2楼2010-03-27 10:31:24
20