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银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于引物探针的非特异性的确认

小弟学习PCR不久,
最近以导师使用已久的一套寡核苷酸序列自行设计引物探针后,
发现在定量PCR扩增后,非特异性上,会出现有1/32的概率出现非特异增长,
让人觉得挺头痛的,
一、要说这套序列不可用也不是这么回事,扩增后曲线线性灵敏度均ok
二、环境污染也不应该只是1/32的概率非特异增长的情况

啧..  老这么下来,都好像找不到原因的所在。

可有进行引物探针设计的老手能够告诉我,如何对此类引物探针的 特异性进行更加准确的判断呢?呵呵呵   谢谢了
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人生不是一种享受,而是一桩沉重异常的工作
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