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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纯化蛋白的浓度测定
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 小白3521 的 2 个金币

小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化蛋白的浓度测定

我纯化了蛋白，想用超滤管浓缩除盐，但是我下一步的工作需要知道将蛋白稀释成一定的浓度，谁知道怎样测蛋白的浓度吗？
如果用紫外分光光度计测的话，我的标准品的对照用甚么好呢？
望大家赐教啊~~~~
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1楼 2010-03-24 16:24:29
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黑罕

金虫 (小有名气)
★ ★
小白3521(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 2010-03-24 16:57
小白3521(金币+1): 2010-03-24 17:06
标准品的对照用除盐后的BUFFER
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2楼2010-03-24 16:46:44
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janet0313

银虫 (小有名气)
★
小白3521(金币+1):谢谢参与
你的蛋白是溶在什么溶液中，进行纯化的？
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3楼2010-03-24 16:48:02
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小白3521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by janet0313 at 2010-03-24 16:48:02:
你的蛋白是溶在什么溶液中，进行纯化的？

用的200mmol的咪唑洗脱
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4楼2010-03-24 17:05:07
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yang0071

木虫 (职业作家)
BCA试剂盒
很便宜
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5楼2010-03-24 17:27:47
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)
UV是很好的测蛋白质浓度的方法，用的调“0”的试剂应该是你最后溶解蛋白质的溶剂~
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看的开才是真本事~
6楼2010-03-24 18:34:56
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l_inhumain

金虫 (小有名气)
用Braford法啊，试剂可以自己配，也有试剂盒买的
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7楼2010-03-24 18:45:14
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小白3521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cyjwx123 at 2010-03-24 18:34:56:
UV是很好的测蛋白质浓度的方法，用的调“0”的试剂应该是你最后溶解蛋白质的溶剂~

但是我超滤过后浓缩除盐了 我用来溶解该蛋白质的溶剂的盐离子浓度肯定大于我最后浓缩得到的蛋白 这样的话不会有影响吗
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8楼2010-03-24 21:26:46
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wulei0708

银虫 (小有名气)
小白3521(金币+1): 2010-03-25 09:34
我们实验室都是用Braford，很好用
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9楼2010-03-25 01:04:49
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