应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助PCR引物设计
91/1返回列表
查看: 564  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 zycly86 的 4 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

zycly86

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助PCR引物设计

我想克隆苹果中一个基因的四个不同基因剪接变体，四个基因在5 和3 末端都相同，如果克隆的话，我是设计四种不同特异引物分别PCR四种基因好呢？还是根据相同的5 和3 末端设计一个引物，同时PCR好呢？ 请大家指点
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-22 08:36:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxx86

金虫 (职业作家)

快乐家族--心飞
★
zycly86(金币+1):谢谢参与
针对不同的基因应该用不同的引物
赞一下(1人) 回复此楼
慢慢走过 蓦然回首 才发现大家都走丢了 人生就是这样吗
2楼2010-03-22 09:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zycly86

铜虫 (小有名气)
1949stone:可以的 谁说不行？ 2010-03-22 09:19
引用回帖:
Originally posted by mxx86 at 2010-03-22 09:03:25:
针对不同的基因应该用不同的引物

设计一个引物，PCR，克隆，然后测序得到三种序列为什么不行呢
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-03-22 09:05:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

delete8080

金虫 (正式写手)
★
zycly86(金币+1):谢谢参与
也可以一个进行PCR，之后跑胶，分离
避免了引物的设计
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-22 09:07:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zycly86

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by delete8080 at 2010-03-22 09:07:19:
也可以一个进行PCR，之后跑胶，分离
避免了引物的设计

那到底哪种方法好呢？
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-22 09:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
★
zycly86(金币+1):谢谢参与
都设计，不就多设计一对嘛，合成引物又不贵，你可以试试
赞一下(1人) 回复此楼
不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
6楼2010-03-22 10:11:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
zycly86(金币+1):谢谢参与
如果你四种不同的基因剪接变体片段大小有些差别的话，可以只设计一对引物的。

然后切胶回收不同大小的就行了。

要是没有差别的话，只设计一条引物也行，后续麻烦一点。

你得多挑克隆做酶切，然后分出你的四种基因剪接变体。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2010-03-22 10:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zycly86

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-03-22 10:18:58:
如果你四种不同的基因剪接变体片段大小有些差别的话，可以只设计一对引物的。

然后切胶回收不同大小的就行了。

要是没有差别的话，只设计一条引物也行，后续麻烦一点。

你得多挑克隆做酶切，然后分出你的 ...

最短的两条长度只相差40个bp, 电泳可以分来吗
赞一下 回复此楼
8楼2010-03-22 10:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)
★
zycly86(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zycly86 at 2010-03-22 11:31:00:

最短的两条长度只相差40个bp, 电泳可以分来吗

2.5%的胶，时间跑长点
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-03-22 11:16:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zycly86 的主题更新
91/1返回列表
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +7 梨花珞晚风 2026-03-17 7/350 2026-03-22 10:03 by 2026paper
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂（0805） +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭