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lzhwin

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教western maker杂带

照片暂时没有数码格式就不放了,现象很简单
NC膜 转膜后立春红染色蛋白和marker都很正常,封闭4度过夜(室温也孵了至少半小时),GFP抗体(abcam)1:10000  GE HRP二抗1:10000 各一个半小时,洗膜3次每次10分钟。thermal的ECL试剂盒(保质期内1ml)显色

问题:整个marker的泳道都是亮的,非常亮红灯下都看得见,X光片上一条泳道全是黑的,但是膜的其它地方都很干净(目标带还是有的,杂带也有一条),完全没有杂点或者别的什么?有没有人遇到过?

自己的分析:如果是MARKER(全式金)有问题那也应该是一条一条的杂带,怎么可能整个泳道都亮了呢?
如果是封闭不完全,那为什么膜别的地方是干净的?

[ Last edited by lzhwin on 2010-3-22 at 08:24 ]
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