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新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR

反转录PCR有什么特点
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

2步合一步了,简单呗
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
2楼2010-03-22 10:13:14
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jane698

VVWW(金币+1): 2010-03-22 14:13
反转录PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)又称为逆转录PCR。其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
3楼2010-03-22 13:46:24
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fxy0570

金虫 (正式写手)

快速特异和操作简便等特点,RNA检测的灵敏性高!
反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平

巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。

所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强。
4楼2010-03-22 14:36:12
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xy914903249

铜虫 (初入文坛)

天使汨
5楼2010-03-22 15:37:57
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